Kháng nguyên-kháng thể phản ứng A. Immunohistological nhuộm của mẫu mô để đánh giá mô học thường cố định trong formalin. Tuy nhiên, thủ tục này làm thay đổi quyết định kháng nguyên của nhiều cấu trúc di động được ưa thích trong các phần cryostat chuẩn bị từ các mẫu đông lạnh nhanh chóng cho immunohistology | Immunofluorescence Rayons uv 365-400 I500 ts55-L 600- I Invisible vert visible 700 production A. Fluorescence . Anticorps fluorescent Fluorescence de FITC Ftltre bioquant ị 450- - 520- 490 nm j f560nm Fittre de bande passante Fittre di- Lampe 510 nm Excitation de FITC Perte dénergie Substrat fluorescent X nm 2. Spectres d absorption et d émission de FITC Lumière fluorescente F1TC- h Immunofluorescence directe 2. Fluorescence double Anticorps primaire anti-humam 3. immunofluorescence indirecte B. Immunofluorescence 3. Microscope à fluorescence Anticorps anti-lg fluorescent anti-souris Anucorps couple à la PE 4. Fluorescence cytoplasmique Analyses biologiques Suspension de cellules Lumière disperses à 90 Dispersion en avant Diode sensible à la lumière 1. Principe c. Cytométrie de flux Photomultiplicateur 530-550 nm vert LwWi 0 560-580 nm rouge 1 Dispersion en avant 2. Separation de fractions cellulaires Témoin negatif Intensity de fluorescence Intensité de fluorescence Hlstogrammes D Hlstogramme de cytometric de flux 75 p. 100 cellules CD3 FITC CD4 PE PE phycoérythrine 2. Dot-Plot analyse de 2 couleurs 75 Analyses biologiques Reactions antigènes-anticorps A. Colorations immunohistologiques Les échantillons de tissus destines à l évaluation histologique sont en general fixes dans du formol. Néanmoins cette procédure altérant les déterminants antigéniques de nombreuses structures cellulaires on préfère les sections prépa-rées au cryostat à partir d échantillons congelés rapidement pour l immunohistologie. Ces sections sont d abord incubées pendant 20 à 30 minutes à 4 C avec des anticorps majoritaire-ment des anticorps monoclonaux murins spéci-fiques de l antigène choisi après des étapes de lavage l incubation avec un anticorps secon-daire contre les Ig de souris a lieu. On se sert fréquemment d anticorps secondaires biotinylés c est-à-dire couplés à la biotine. La biotine pos-sède une affinité extrêmement élevée pour la protéine streptavidine cette dernière est ajoutée
