Có ba nhóm vector chính được sử dụng trong tạo dòng DNA và nhân bản chúng trong tế bào vật chủ (E. coli hoặc nấm men), bao gồm: 1) Nhóm plasmid, 2) Nhóm phage/phagemid, và 3) Nhóm nhiễm sắc thể nhân tạo (artificial chromosome: BAC và YAC). Ý tưởng về vector chuyển gen bắt nguồn từ các plasmid của vi khuẩn. | Chương 4 Các hệ thống vector Có ba nhóm vector chính được sử dụng trong tạo dòng DNA và nhân bản chúng trong tế bào vật chủ E. coli hoặc nấm men bao gồm 1 Nhóm plasmid 2 Nhóm phage phagemid và 3 Nhóm nhiễm sắc thể nhân tạo artificial chromosome BAC và YAC . Ý tưởng về vector chuyển gen bắt nguồn từ các plasmid của vi khuẩn. Vector chuyển gen là phân tử DNA có khả năng tự tái sinh tồn tại độc lập trong tế bào và mang được các gen cần chuyển. Các vector chuyển gen phải thỏa mãn các yêu cầu tối thiểu sau - Có trình tự khởi đầu sao chép ori để có thể tự sao chép mà tồn tại độc lập. - Có các vị trí nhận biết đơn single recognition sites-SRS nơi mà các enzyme hạn chế nhận biết để cắt rời làm chỗ lắp ráp đoạn gen ngoại lai vào. Các trình tự này thường nằm xa điểm khởi đầu sao chép để tránh bị cắt nhầm. - Có trình tự khởi động promoter để tiến hành phiên mã gen ngoại lai. - Đảm bảo sự di truyền bền vững của DNA tái tổ hợp ở dạng độc lập hay gắn vào nhiễm sắc thể của tế bào vật chủ. - Có các gen chỉ thị marker genes để dễ dàng phát hiện ra thể tái tổ hợp. Ngoài ra chúng còn phải có những đặc tính bổ sung khác để cho việc tạo dòng dễ thực hiện như là - Chứa các gen làm vô hiệu hóa đoạn DNA không mong muốn được gắn vào. - Có nhiều bản sao để được tách ra khỏi tế bào với số lượng lớn và đảm bảo sự khuếch đại của gen ngoại lai. - Ngoài promoter cần có thêm các trình tự nucleotide khác cần thiết cho sự biểu hiện của gen chẳng hạn như RBS ribosome binding sites-vùng liên kết với ribosome để dịch mã . Giá trị của vector ở chỗ nó được thiết kế sao cho thật thuận tiện với các mục đích sử dụng khác nhau. Không có vector toàn năng cho chuyển gen mà cần có sự chọn lựa tùy mục đích và kích thước của đoạn gen được tạo dòng. Chúng được thiết kế với nhiều chức năng chuyên biệt để mang được các trình tự nucleotide như mong muốn. Các vector chuyển gen có năm ứng dụng quan trọng chủ yếu - Tạo dòng cloning và khuếch đại amplification một đoạn trình tự của DNA nhiều bản sao giống nhau . - .
