Luận văn nhằm các mục tiêu: (1) Tối ưu được môi trường lên men thu nhận hoạt chất acarbose từ Actinoplanes sp. KCTC 9161 đạt năng suất cao; (2) Nâng cao khả năng sản xuất hoạt chất acarbose bằng phương pháp gây đột biến; (3) Xây dựng được quy trình tách chiết, tinh sạch acarbose. | Lin và cs (2007) đã tinh sạch acarbose từ dịch lên men nhờ sử dụng sắc ký trao đổi cation mạnh và sắc ký ái lực với enzyme gắn kết acarbose α-amyloglucosidase, đã thu được acarbose với độ tinh sạch đạt 95%. Dịch lên men được ly tâm loại tủa, dịch nổi cô đặc 1/10 (v/v), bổ sung thêm 9/10 ethanol sau 30 phút ly tâm loại tủa, dịch nổi thu được cô đặc và làm khô thành dạng bột với acarbose tinh sạch khoảng 10%. Bột acarbose chưa tinh sạch được hòa với nước, điều chỉnh pH 5-9 để đưa lên cột. Sử dụng cột sắc ký trao đổi cation mạnh như: amberjet 1200H hoặc amberjet 1200Na đã được rửa bằng nước deion đến pH ≥ 4, đưa mẫu lên cột, để 30 phút cho gắn kết acarbose. Sau đó, rửa cột 3 lần bằng nước để loại hết những chất không gắn, tiếp tục rửa cột bằng NaCl 1,0 N để thu chất giống đường và rửa bằng dung dịch ammonia 0,75 N để loại các tạp chất khác, cuối cùng thu acarbose bằng dung dịch ammonia 1,5 N, với độ tinh sạch đạt 60%. Dịch thu tiếp tục được tủa với ethanol sau đó làm khô thu được acarbose có độ tinh sạch đạt 75-80%. Acarbose tiếp tục được tinh sạch bằng sắc ký ái lực với hạt sắc ký amberject 4400 OH có chứa emzyme gắn kết α-amyloglucosidase. Bột acarbose tinh sạch 75-80% hòa với nước, pH 6-7 và đưa lên cột. Rửa cột bằng nước đề ion ở nhiệt độ 55-75
