Mục tiêu nghiên cứu: Phát hiện nhanh các chủng vi khuẩn lao kháng thuốc thông qua xác định các vị trí đột biến liên quan kháng thuốc trên gen katG và rpoB bằng phương pháp giải trình tự và kỹ thuật multiplex real-time PCR. | Tín hiệu huỳnh quang nền (threshold - đường ngưỡng) được tạo ra trong phản ứng real-time PCR là do các chất phát huỳnh quang có nồng độ xác định có sẵn trong thành phần phản ứng real-time PCR. Trong phản ứng real-time PCR sử dụng Taqman probe thì chính các quencher của Taqman probe sẽ đóng vai trò tạo tín hiệu nền cho phản ứng. Để có thể xác định được cường độ huỳnh quang nền, thiết bị real-time thường ghi nhận cường độ tín hiệu huỳnh quang do một probe phát ra trong ống phản ứng trong một số chu kỳ đầu. Do trong phản ứng multiplex real-time PCR chứa nhiều probe khác nhau trong cùng một phản ứng nên cường độ huỳnh quang nền phải được hiệu chỉnh giữa các cường độ huỳnh quang nền của các probe đó. Do vậy, để thiết lập được đường tín hiệu huỳnh quang nền trong trường hợp này cần phải tiến hành chạy kiểm tra trên số lượng mẫu đủ lớn sau đó lấy số liệu thống kê và đưa ra giá trị cường độ huỳnh quang nền cuối cùng. Trong nghiên cứu này, chúng tôi tôi sử dụng 45 mẫu DNA tách từ vi khuẩn lao đã biết chính xác các vị trí đột biến thông qua phương pháp giải trình tự như trên. Bằng cách chạy multiplex real-time PCR với 45 mẫu này, lấy số liệu thống kê và đưa ra số liệu cuối cùng về giá trị của tín hiệu huỳnh quang nền (
