Bài viết này đề cập đến phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) khuếch đại DNA với độ đặc hiệu và độ nhạy cao được ứng dụng để phát hiện nhanh vi khuẩn E. ictaluri. Các mồi được thiết kế để khuếch đại đoạn gen eip18 có kích thước khoảng 480 bp trong DNA genome của E. ictaluri. | Tạp chí Công nghệ Sinh học 9(1): 61-65, 2011 PHÁT HIỆN VI KHUẨN EDWARDSIELLA ICTALURI GÂY BỆNH TRÊN CÁ TRA VIỆT NAM BẰNG KỸ THUẬT PCR Trần Thị Thanh Huyền1, Nguyễn Thị Trung2, Trương Nam Hải2 1 2 Trường ðại học Khoa học tự nhiên, ðại học Quốc gia Hà Nội Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam TÓM TẮT Hiện nay, cá Tra và cá Basa bị nhiễm bệnh ñốm trắng nội tạng ñang trở nên phổ biến ở Việt nam. Vi khuẩn Edwardsiella ictaluri là một trong các tác nhân gây ra bệnh gan thận mủ ở cá Tra. Tác nhân này ñe dọa nghiêm trọng ñến sự phát triển bền vững và giá trị kinh tế của ngành Thủy sản. Việc phát hiện ra vi khuẩn này sớm rất có ý nghĩa quan trọng trong việc quản lý bệnh cá Tra không chỉ ở Việt Nam mà cả ở các nước trên thế giới. Bài báo này ñề cập ñến phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) khuếch ñại DNA với ñộ ñặc hiệu và ñộ nhạy cao ñược ứng dụng ñể phát hiện nhanh vi khuẩn E. ictaluri. Các mồi ñược thiết kế ñể khuếch ñại ñoạn gen eip18 có kích thước khoảng 480 bp trong DNA genome của E. ictaluri. Các kết quả nhận ñược chỉ ra rằng kĩ thuật PCR sử dụng cặp mồi thiết kế ñã khuếch ñại ñoạn DNA có kích thước khoảng 480 bp từ DNA genome vi khuẩn E. ictaluri, nhưng không khuếch ñại ñối với DNA genome của vi khuẩn E. tadar và một số tác nhân gây bệnh khác như: E. coli, Proteus, Salmonella. Kỹ thuật này có khả năng khuếch ñại ñoạn DNA khi mật ñộ E. ictaluri khoảng 3 cfu/ml. Như vậy, có thể sử dụng kĩ thuật PCR khuếch ñại gen eip18 ñể phát hiện nhanh E. ictaluri. Từ khóa: cá Tra, Edwardsiella ictaluri, eip18, PCR MỞ ðẦU Cho ñến nay, một số tác giả công bố các kết quả nghiên cứu về bệnh gan thận mủ trên cá Tra và cá Basa ñã kết luận rằng vi khuẩn E. ictaluri là một trong những tác nhân gây ra bệnh mủ gen ở cá Tra và cá Basa Việt Nam. Vi khuẩn E. ictaluri (thuộc họ Enterbacteriaceae) là vi khuẩn gram âm, hình que, không sinh bào tử, yếm khí tùy tiện, phản ứng catalase dương tính, oxidase âm tính. Hiện nay, bệnh do vi khuẩn Edwardsiella ñã và ñang gây .
