Trong bài viết này, sự di truyền của cấu trúc gen chuyển và tính kháng virus của các dòng thuốc lá chuyển gen tiếp tục được đánh giá ở thế hệ T1. Kết quả đã thu được 10 dòng cây mang cấu trúc RNAi TMV và 6 dòng cây mang cấu trúc RNAi TCYS có sự phân li gen chuyển là 3:1. Phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu và lai Southern blot, kết hợp với lai Nothern blot đã chứng minh sự di truyền và hoạt động của cấu trúc gen chuyển trong các dòng thuốc lá chuyển gen ở cả 2 giống K326 và C9-1. | TAP CHI SINH HOC 2016,tính 38(2): 279-286 Đánh giá sự ổn định kháng virus DOI: ĐÁNH GIÁ SỰ ỔN ĐỊNH TÍNH KHÁNG VIRUS CỦA CÁC DÒNG THUỐC LÁ CHUYỂN GEN MANG CẤU TRÚC RNAi TMV VÀ RNAi TCYS Ở THẾ HỆ T1 Lê Thị Thủy2, Phạm Thị Vân1, Nguyễn Văn Đoài1, Lâm Đại Nhân1, Lê Văn Sơn1* 1 Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *levanson@ 2 Trường Đại học Sư phạm Hà Nội TÓM TẮT: Nghiên cứu tạo giống cây trồng kháng virus bằng công nghệ RNAi là phương pháp hiện đại và hiệu quả trong việc phòng chống các bệnh virus hại thực vật. Trong các công bố trước, chúng tôi đã tạo được các dòng thuốc lá T0 giống K326 và C9-1 chuyển gen mang cấu trúc RNAi TMV và RNAi TCYS có khả năng kháng hoàn toàn với virus. Trong nghiên cứu này, sự di truyền của cấu trúc gen chuyển và tính kháng virus của các dòng thuốc lá chuyển gen tiếp tục được đánh giá ở thế hệ T1. Kết quả đã thu được 10 dòng cây mang cấu trúc RNAi TMV và 6 dòng cây mang cấu trúc RNAi TCYS có sự phân li gen chuyển là 3:1. Phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu và lai Southern blot, kết hợp với lai Nothern blot đã chứng minh sự di truyền và hoạt động của cấu trúc gen chuyển trong các dòng thuốc lá chuyển gen ở cả 2 giống K326 và C9-1. Qua thí nghiệm lây nhiễm với virus, mỗi dòng thuốc lá chuyển cấu trúc RNAi TMV đều thu được cây kháng hoàn toàn với virus khảm thuốc lá, với tỷ lệ kháng dao động từ 5-20%. Trong 6 dòng chuyển cấu trúc RNAi TCYS, thu được 3 dòng có cây kháng hoàn toàn với 4 virus là TMV, CMV, TYLCV và TSWV, với tỷ lệ kháng 5%. Kết quả nghiên cứu này cho thấy, tính kháng virus tạo được đã di truyền sang cây chuyển gen thế hệ T1, mở ra cơ hội cho sự phát triển giống thuốc lá chuyển gen kháng các loại virus gây hại phổ biến ở Việt Nam. Từ khóa: Lây nhiễm virus, RNAi, thuốc lá, TMV, tính kháng virus. MỞ ĐẦU Với khoảng loài hại thực vật được phát hiện và hơn 650 loài đã được nghiên cứu, virus là một trong những tác nhân gây bệnh chính làm giảm sản lượng cây trồng trong .
