Trong bài báo này, gen IL-6 của gà nuôi tại Việt Nam đã được tách dòng và gắn vào vector trung gian, làm cơ sở cho thiết kế vector adenovirus, một công cụ chuyển gen IL-6 cho gà nhằm tăng cường miễn dịch của vật nuôi. | TẠP CHÍ SINH HỌC, 2013, 35(1): 105-109 TÁCH DÒNG VÀ THIẾT KẾ VECTOR TRUNG GIAN MANG GEN IL-6 CỦA GÀ VIỆT NAM Vũ Thị Thu Huyền*, Nguyễn Thị Kim Cúc, Lê Thị Hồng Minh, Trần Thị Kim Dung, Phạm Việt Cường Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *huyenvuibt@ TÓM TẮT: Cytokines là một họ đa protein có vai trò quyết định trong kiểm soát hệ miễn dịch. Chúng xác định cả kiểu và qui mô của đáp ứng miễn dịch sau khi bị nhiễm nguồn bệnh hoặc chủng ngừa. Trong khuôn khổ bài báo này, gen IL-6 của gà đã được tách dòng và gắn vào một vector con thoi, là trung gian để làm cơ sở cho việc thiết kế adenovirus vector, đưa gen cytokines vào gia cầm để tăng cường đáp ứng miễn dịch của chúng tới nguồn bệnh. Bằng phương pháp PCR, với cặp mồi đặc hiệu cho gen IL-6 của gà với các trình tự nhận biết của enzymes giới hạn Kpn I, Not I và trình tự Kozak, đã tách dòng gen IL-6 của gà (ChIL-6) vào vector . Trình tự gen ChIL-6 trong vector tách dòng đã được giải, có 726 nucleotides và sau khi BLASTn thấy trình tự này tương đồng 99% so với một số trình tự khác trong Ngân hàng gen quốc tế. Để thiết kế vector trung gian pShuttle mang gen IL-6 của gà, plasmid tách dòng và plasmid trung gian pShuttle được xử lý bằng Kpn I và Not I, sau đó, tiến hành phản ứng nối ghép gen IL-6 vào pShuttle đã được mở vòng với sự giúp đỡ của T4 ligase và chọn các dòng DH5α biến nạp trên môi trường có ampicilin. Kiểm tra sự có mặt của gen ChIL-6 trong pShuttle bằng enzymes giới hạn Kpn I và Not I cũng như phương pháp PCR. Kết quả nhận được cho thấy gen ChIL-6 đã được gắn vào plasmid trung gian pShuttle và tạo vector tái tổ hợp pShuttle/ChIL-6. Từ khóa: Cytokine, gà Việt Nam, interleukin-6, tách dòng, vector con thoi. MỞ ĐẦU Cytokines là một họ đa protein có vai trò quyết định trong kiểm soát hệ miễn dịch. Chúng xác định cả kiểu và qui mô của đáp ứng miễn dịch sau khi bị nhiễm nguồn bệnh hoặc chủng ngừa. Phụ thuộc vào tổ hợp các cytokines được tạo ra, đáp ứng miễn dịch
