Trong bài viết này, promoter cảm ứng nhiệt () được phân lập từ cây Arabidopsis thaliana, để phục vụ cho việc điều khiển biểu hiện protein tái tổ hợp ở các mức nhiệt độ khác nhau trong tế bào thực vật. Trình tự đoạn nucleotide của tương tự với các trình tự promoter cảm ứng nhiệt (mã số và ) đã công bố trên Ngân hàng Gen quốc tế GENBANK. | TAP CHI SINH HOC 2014, 36(3): 385-392 Phân lập promoter cảm ứng nhiệt DOI: PHÂN LẬP PROMOTER (ĐOẠN ĐIỀU KHIỂN) CẢM ỨNG NHIỆT VÀ ỨNG DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN PROTEIN TÁI TỔ HỢP Nguyễn Chi Mai1, Nguyễn Tường Vân2, Trần Mỹ Linh3, Lê Quỳnh Liên3* 1 Trung tâm Phát triển công nghệ cao, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam 2 Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam 3 Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *lienle@ TÓM TẮT: Promoter (đoạn điều khiển) là đoạn trình tự nucleotide nằm về phía đầu 5’ của vị trí khởi đầu phiên mã và có vai trò khởi động quá trình phiên mã tạo protein. Vì vậy, điều khiển tổng hợp protein thông qua các promoter đặc hiệu là một trong những yếu tố quan trọng để kiểm soát quá trình sản xuất protein tái tổ hợp. Trong nghiên cứu này, promoter cảm ứng nhiệt () được phân lập từ cây Arabidopsis thaliana, để phục vụ cho việc điều khiển biểu hiện protein tái tổ hợp ở các mức nhiệt độ khác nhau trong tế bào thực vật. Trình tự đoạn nucleotide của tương tự với các trình tự promoter cảm ứng nhiệt (mã số và ) đã công bố trên Ngân hàng Gen quốc tế GENBANK. Các nhân tố cảm ứng nhiệt (Heat shock element: HSE) trên promoter có trình tự bảo thủ, tạo điều kiện thuận lợi cho việc điều hòa biểu hiện gen đích bằng cảm ứng nhiệt. Đoạn trình tự của đã được gắn vào vector chuyển gen , tạo thành cassette biểu hiện gen mã hóa protein huỳnh quang xanh (GFP) dưới sự điểu khiển của promoter này. Kiểm tra hoạt động của trên các dòng tế bào thuốc lá BY-2 chuyển gen gfp ở 3 điều kiện nhiệt độ 35, 37 và 42°C cho thấy điều kiện cảm ứng tốt nhất là 37°C/2h. Tại điều kiện cảm ứng 37°C/2h, cũng đã được chứng minh điều khiển thành công biểu hiện kháng nguyên HA1 của virus cúm gia cầm H5N1 trong tế bào thuốc lá nuôi cấy BY-2. Đây là công trình nghiên cứu đầu tiên
