Bài viết tiến hành nghiên cứu tổng hợp nhân tạo gen miraculin với mã di truyền được tối ưu hóa trong dòng tế bào thuốc lá BY-2. Gen miraculin được chèn vào hai cấu trúc pBI121/HSP-pro:Mir:HSP-ter với promoter và terminator của gen HSP được phân lập từ cây Arabidopsis thaliana có hiệu quả tăng cường biểu hiện của protein tái tổ hợp và pBI121/35S-pro:Mir:NOS-ter. | TAP CHI SINH HOC 2014, 36(3): 367-372 Biểu hiện protein tái tổ hợp miraculin dòng tế bào thuốc lá DOI: trong BIỂU HIỆN PROTEIN TÁI TỔ HỢP MIRACULIN TRONG DÒNG TẾ BÀO THUỐC LÁ BY-2 (Nicotiana tabacum L. Cv Bright Yellow-2) La Việt Hồng1,2, Nguyễn Thu Giang1, Phạm Bích Ngọc1, Chu Hoàng Hà1* 1 Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH & CN Việt Nam, *chuhoangha@ 2 Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 TÓM TẮT: Miraculin là một protein tạo cảm giác ngọt và ít sinh năng lượng, được tách chiết từ quả cây thần kỳ (Richadella dulcifica), một loại cây bụi ở Tây Phi. Trong nghiên cứu này, chúng tôi tiến hành tổng hợp nhân tạo gen miraculin với mã di truyền được tối ưu hóa trong dòng tế bào thuốc lá BY-2. Gen miraculin được chèn vào hai cấu trúc pBI121/HSP-pro:Mir:HSP-ter với promoter và terminator của gen HSP được phân lập từ cây Arabidopsis thaliana có hiệu quả tăng cường biểu hiện của protein tái tổ hợp và pBI121/35S-pro:Mir:NOS-ter. Các cấu trúc này được sử dụng để chuyển gen miraculin vào các dòng tế bào thuốc lá BY-2. Các dòng tế bào BY-2 được đánh giá bằng kỹ thuật PCR và lai miễn dịch Western blot. Kết quả cho thấy, chúng tôi đã tạo được các dòng tế bào BY-2 sinh trưởng ổn định trong môi trường lỏng sau 4-5 lần cấy chuyển với khoảng cách giữa mỗi lần là 2 tuần. Các dòng BY-2 sinh trưởng ổn định và biểu hiện protein tái tổ hợp miraculin có kích thước khoảng 43-45 kDa, trong đó các dòng tế bào BY-2 được chuyển cấu trúc HSP-pro:Mir:HSP-ter biểu hiện mạnh hơn so với các dòng BY-2 được chuyển cấu trúc 35Spro:Mir: NOS-ter. Đây là lần đầu tiên ở Việt Nam và trên thế giới, protein tạo cảm giác ngọt miraculin được biểu hiện trong dòng tế bào thuốc lá BY-2. Kết quả này mang lại tiềm năng lớn cho nghiên cứu và sản xuất protein miraculin trong thực tiễn. Từ khóa: Béo phì, BY-2, cảm giác ngọt, cây thần kỳ, miraculin, tế bào thuốc lá. MỞ ĐẦU Miraculin là một protein tạo cảm giác ngọt được tách ra từ quả cây thần kỳ (Richadella dulcifica), là
