Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm thiết lập phương pháp PCR phiên mã ngược phát hiện virut gây hội chứng viêm đường hô hấp cấp Trung Đông (MERS-CoV). nội dung chi tiết của tài liệu. | TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 8-2014 XÂY DỰNG QUY TRÌNH PCR ĐIỆN DI PHÁT HIỆN VIRUT GÂY HỘI CHỨNG VIÊM ĐƢỜNG HÔ HẤP CẤP TRUNG ĐÔNG Ngô Tất Trung*; Trần Thị Thu Hiền*; Phan Quốc Hoàn*; Lê Hữu Song* TÓM TẮT Đặc điểm lâm sàng của chứng viêm đường hô hấp cấp Trung Đông (Middle East respiratory syndrome gây ra bởi Middle East respiratory syndrome coronavirus MERS-CoV) dễ nhầm với hội chứng viêm đường hô hấp cấp (Severe acute respiratory syndrome - SARS). Tại thời điểm hiện tại, chúng ta chưa có công cụ chẩn đoán phát hiện tác nhân gây bệnh nguy hiểm này. Thiết lập quy trình PCR điện di phát hiện virut gây hội chứng MERS-CoV. Phần mềm Invitrogene vector và các bệnh phẩm chuẩn âm được thu thập tại Bệnh viện TWQĐ 108. Tổng hợp cADN phiên mã ngược và PCR điện di một vòng. Kết quả cho thấy bộ mồi SHPT108@MERSCoV-L, SHPT108@MERS-CoV-S hoàn toàn có khả năng phát hiện sự có mặt các đoạn ARN coronavirus ở mật độ 1 copy ARN virut/ copy ARN đối chứng, đồng thời không tạo ra băng PCR phụ và không bắt cặp chéo vào các khu vực có tính tương đồng thấp của hệ gen người. Kết luận: kỹ thuật PCR điện di phát hiện ARN coronavirus đã được thiết kế thành công. * Từ khóa: Hội chứng viêm đường hô hấp cấp Trung Đông; Betacoronarivus. ESTABLISH A PCR ASSAY FOR DIAGNOSING MIDDLE EAST RESPIRATORY SYNDROME BETA-CORONAVIRUS SUMMARY Middle East respiratory syndrome is clinically similiar to severe acute respiratory syndrome (SARS) hence, but the tool to differentiate the two diseases is unavailable at the moment. The aim of this study is to build up a simple screening procedure for beta-coronavirus (MERS-CoV). The reverse transcriptase followed by polymerase chain reaction (PCR): Results shown that the two primer set SHPT108@MERS-CoV-L, SHPT108@MERS-CoV-S were optimized that allow to detect presence of one betacoronavirus RNA copy out of 1,000 ABL RNA copies without any mis-amplification from MERS-CoV free samples. * Key words: Middle East respiratory syndrome; Betacoronavirus. ĐẶT
