Bài viết trình bày về bảy chủng vi sinh vật (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae và Candida albicans) được định danh đưa vào làm chứng dương để tối ưu hóa quy trình PCR đa mồi. | TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ NĂM 2012 NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHẨN ĐOÁN VI SINH VẬT GÂY NHIỄM KHUẨN HUYẾT BẰNG PCR ĐA MỒI Lê Hữu Song*; Nguyễn Trọng Chính* Ngô Tất Trung*; Phan Quốc Hoàn* TÓM TẮT Bảy chủng vi sinh vật (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae và Candida albicans) ®-îc định danh đưa vào làm chứng dương để tối ưu hóa quy trình PCR đa mồi. Kết quả cho thấy, 2 bộ PCR (5 lex + 2 lex) có thể phát hiện 7 mầm bệnh này với độ đặc hiệu 100% và độ nhạy của phương pháp là 100 CFU/ml. * Từ khóa: Nhiễm khuẩn huyết; PCR đa mồi. Establishing protocol of multiplex PCR for identifying pathogens caused sepsis summary Colonies of Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, and Candida albicans were used as positive control to monitor the success of multiplex-PCR assay. The result showed that two set of multiplex - PCR (5lex + 2 lex) can detect these 7 pathogens with 100% of specificity and a sensitivety of 100 CFU/ml. * Key words: Sepsis; Multiplex PCR. ĐẶT VẤN ĐỀ Nhiễm khuẩn huyết (NKH) đã và vẫn là một trong những nguyên nhân gây tử vong cao. Theo thống kê của Cơ quan Kiểm soát Bệnh Hoa Kỳ (CDC), bệnh này gây tử vong đứng hàng thứ 11. Chỉ tính riêng ở Mỹ, hàng năm có hơn trường hợp > 65 tuổi bị mất trí do NKH [1]. Ở nước ta, cho đến nay vẫn chưa có số liệu thống kê tình hình NKH tại các cơ sở y tế trong toàn quốc. Tuy nhiên, một số nghiên cứu cho thấy tỷ lệ NKH tại Khoa Hồi sức Bệnh viện Nhi TƯ là 9,4/1000 BN/ngày, tỷ lệ tử vong lên tới 20% trong số những trường hợp NKH [2]. Cấy máu hiện đang được cho là tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán mầm bệnh trong NKH [3, 4]. Tuy nhiên, việc lấy một lượng máu lớn ở bệnh nhi sơ sinh là một việc rất khó khăn, quy trình thực hiện thường kéo dài từ 48 - 72 giờ mới có kết quả sơ bộ. * Bệnh viện TWQĐ 108 Chịu .