Enzyme pectinase thường được dùng trong công nghiệp thực phẩm và dược phẩm đặc biệt trong công nghệ sản xuất các loại nước quả và rượu vang. Người ta sử dụng enzyme pectinase để khử pectin, tránh hiện tượng bị đục và lắng cặn trong quá trình sản xuất và bảo quản [3,5]. Trong bài báo cáo này, chúng tôi trình bày kết quả nghiên cứu điều kiện thích hợp để thu nhận và tinh sạch enzyme pectinase bằng lọc gel và lọc màng. | TAÏP CHÍ PHAÙT TRIEÅN KH&CN, TAÄP 11, SOÁ 08 - 2008 THU NHẬN ENZYME PECTINASE TỪ - TINH SẠCH BẰNG PHƯƠNG PHÁP LỌC GEL & LỌC MÀNG Huỳnh Ngọc Oanh, Trần Ngọc Hùng Trường Đại học Bách khoa, ĐHQG -HCM THIỆU Enzyme pectinase là enzyme xúc tác sự thủy phân pectin (polysaccharide dị thể). Pectinase được sản xuất chủ yếu bởi nấm mốc Aspergillus sp., Botrytis cinerea, Fusarium moniliforme, Rhizopus stolonifer, Trichoderma sp., Neurospora crassa Enzyme pectinase thường được dùng trong công nghiệp thực phẩm và dược phẩm đặc biệt trong công nghệ sản xuất các loại nước quả và rượu vang. Người ta sử dụng enzyme pectinase để khử pectin, tránh hiện tượng bị đục và lắng cặn trong quá trình sản xuất và bảo quản [3,5]. Trong bài báo cáo này, chúng tôi trình bày kết quả nghiên cứu điều kiện thích hợp để thu nhận và tinh sạch enzyme pectinase bằng lọc gel và lọc màng. 2. NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP . Nguyên liệu thu nhận enzyme pectinase Nấm mốc Aspergillus niger được giữ giống trên môi trường Czapek. Bột cà rốt: cà rốt xay nhuyễn, sấy ở nhiệt độ 60oC cho đến khi độ ẩm cà rốt đạt 4% (nguồn pectin – chất cảm ứng) Thành phần môi trường nuôi cấy thu nhận enzyme pectinase gồm: cám gạo 65,5%, trấu 21,5%, bột cà rốt 11%, (NH4)2SO4 2%, độ ẩm 55%. Khử trùng 121oC trong 30 phút. . Phương pháp nuôi cấy thu nhận enzyme pectinase từ phương pháp nuôi cấy bề mặt [2] . Xác định hoạt độ enzyme pectinase [4] Enzyme pectinase thô được xác định hoạt độ bằng phương pháp đo độ nhớt với nhớt kế Borosil: hút 2ml dung dịch enzyme thô 5% (w/v) phản ứng với 18ml dung dịch pectin 1% ở pH 4,5 và nhiệt độ 40oC. Một đơn vị hoạt độ pectinase (UI) là lượng enzyme cần thiết làm giảm 10% độ nhớt của hỗn hợp chứa 180mg pectin dưới những điều kiện như trên. . Hàm lượng protein của chế phẩm enzyme được xác định bằng phương pháp Lowry[1] . Phân tích chế phẩm enzyme bằng phương pháp lọc gel Bio Gel P 30 Hòa tan chế phẩm enzyme thô trong đệm Mc Ilvaine pH 4,5 ly tâm bỏ cặn thu được dung dịch .