β-Galactosidase (β-D-galactoside galactohydrolase, EC ) hay còn gọi là lactase, là một enzyme có ứng dụng rất quan trọng trong công nghiệp sữa. Từ nguồn vi khuẩn lactic Lactobacillus acidophilus có hoạt tính β-galactosidase cao và ổn định, việc nghiên cứu thu nhận enzyme thô được tiến hành bằng phương pháp trích ly kết hợp xử lý sóng siêu âm và kết tủa bởi các tác nhân là muối trung tính và dung môi hữu cơ. Tác nhân kết tủa tốt nhất là isopropanol với hiệu suất thu hồi 89,93% và độ tinh sạch 4,5lần. Chế phẩm enzyme được tinh chế qua cột Ultrahydrogel 250, độ tinh sạch tăng 14,3 lần. Đã xác định được phân tử lượng của β-galactosidase khoảng 40 kDa. Chế phẩm sau khi tinh sạch có hoạt tính tối ưu ở 40oC, pH 7 – 7,5 có giá trị Vmax và Km lần lượt là 2,3 μmol/phút và 0,73 mM. | TAÏP CHÍ PHAÙT TRIEÅN KH&CN, TAÄP 15, SOÁ T3- 2012 THU NHẬN VÀ TINH SẠCH β-GALACTOSIDASE TỪ LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS Nguyễn Thị Vân Linh(1), Nguyễn Thị Thùy Dung(2), Trần Bích Lam(2) (1) Trường ðại học Nguyễn Tất Thành (2) Trường ðại học Báck khoa, ðHQG – HCM (Bài nhận ngày 18 tháng 12 năm 2012, hoàn chỉnh sửa chữa ngày 09 tháng 01 năm 2013) TÓM TẮT: β-Galactosidase (β-D-galactoside galactohydrolase, EC ) hay còn gọi là lactase, là một enzyme có ứng dụng rất quan trọng trong công nghiệp sữa. Từ nguồn vi khuẩn lactic Lactobacillus acidophilus có hoạt tính β-galactosidase cao và ổn ñịnh, việc nghiên cứu thu nhận enzyme thô ñược tiến hành bằng phương pháp trích ly kết hợp xử lý sóng siêu âm và kết tủa bởi các tác nhân là muối trung tính và dung môi hữu cơ. Tác nhân kết tủa tốt nhất là isopropanol với hiệu suất thu hồi 89,93% và ñộ tinh sạch 4,5lần. Chế phẩm enzyme ñược tinh chế qua cột Ultrahydrogel 250, ñộ tinh sạch tăng 14,3 lần. ðã xác ñịnh ñược phân tử lượng của β-galactosidase khoảng 40 kDa. Chế phẩm sau khi tinh sạch có hoạt tính tối ưu ở 40oC, pH 7 – 7,5 có giá trị Vmax và Km lần lượt là 2,3 µmol/phút và 0,73 mM. Từ khóa: thu nhận β-galactosidase, β-galactosidase từ L. acidophilus. Lactobacillus acidophilus nhận ñược nhiều sự MỞ ðẦU (β-D-galactoside quan tâm của các nhà nghiên cứu bởi vi khuẩn galactohydrolase, EC ) hay còn gọi là này có hoạt tính β-galactosidase rất cao. Mục lactase xúc tác phản ứng thủy phân lactose ñích của nghiên cứu này là thu nhận và tinh thành glucose và galactose và phản ứng chuyển sạch β-galactosidase từ L. acidophilus. Chế nhóm galactosyl tạo thành các galacto- phẩm sau khi tinh sạch bằng phương pháp kết oligosaccharide [1, 2]. ðây là một enzyme có tủa và lọc gel ñược xác ñịnh các tính chất Topt, nhiều ứng dụng quan trọng trong công nghệ pHopt, sự ổn ñịnh nhiệt, sự ổn ñịnh pH và hằng thực phẩm, sinh học cũng như trong kỹ thuật và số Michaelis Km và Vmax. môi trường [3, 4]. β-Galactosidase có thể .
