Sử dụng chỉ thị phân tử RAPD để đánh giá sự di truyền của một số giống lúa (Oryza sativa L.)

Nội dung bài viết là nghiên cứu và đánh giá mức độ chịu hạn của 7 giống lúa do Viện cây lương thực và thực phẩm và Viện bảo vệ thực vật cung cấp. Mời các bạn tham khảo! | T¹p chÝ Khoa häc & C«ng nghÖ - Sè 4(48) Tập 1/N¨m 2008 Khoa häc Sù sèng Sö dông chØ thÞ ph©n tö RAPD ®Ó ®¸nh gi¸ sù ®a d¹ng di truyÒn cña mét sè gièng lóa (Oryza sativa L .) Chu ThÞ Minh Ph−¬ng (Tr−êng §H S− ph¹m Hµ Néi) - Lß ThÞ Mai Thu (Tr−êng §H T©y B¾c), §ç ThÞ Thu H»ng - NguyÔn Vò Thanh Thanh - Chu Hoµng MËu (§H Th¸i Nguyªn) 1. Më ®Çu Lóa lµ c©y trång quan träng nhÊt, cung cÊp l−¬ng thùc cho h¬n mét nöa d©n sè trªn thÕ giíi. ViÖc nghiªn cøu chän t¹o c¸c gièng lóa cã n¨ng suÊt cao, chÊt l−îng tèt vµ chèng chÞu ®−îc víi ®iÒu kiÖn bÊt lîi cña ngo¹i c¶nh ®ang ®−îc c¸c nhµ khoa häc quan t©m. §Ó cã c¬ së khoa häc cho viÖc chän t¹o c¸c gièng lóa theo ®Þnh h−íng n¨ng suÊt cao vµ kh¶ n¨ng chèng chÞu tèt ®ßi hái ph¶i ph©n tÝch c¸c chØ tiªu sinh lÝ, hãa sinh, x¸c ®Þnh quan hÖ di truyÒn vµ t×m c¸c chØ thÞ ë møc ®é ph©n tö. Mét trong c¸c ph−¬ng ph¸p x¸c ®Þnh chØ thÞ ph©n tö vµ quan hÖ di truyÒn ë c©y trång dÔ sö dông vµ cã hiÖu qu¶ cao lµ chØ thÞ RAPD (Random Amplified Polymorphism DNA) [2], [3], [5], [6], [7]. Trong nghiªn cøu tr−íc [1], chóng t«i ®M ®¸nh gi¸ vµ x¸c ®Þnh møc ®é chÞu h¹n cña 7 gièng lóa do ViÖn C©y l−¬ng thùc vµ thùc phÈm vµ ViÖn B¶o vÖ thùc vËt cung cÊp. §Ó tiÕp tôc ph¸t triÓn h−íng nghiªn cøu nµy, chóng t«i quan t©m ®Õn c¸c chØ thÞ ph©n tö vµ x¸c ®Þnh quan hÖ di truyÒn cña 7 gièng lóa nµy, nh»m t¹o c¬ së cho viÖc tuyÓn chän c¸c gièng lóa cã chÊt l−îng tèt lµm vËt liÖu cho chän gièng. 2. VËt liÖu vµ ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu VËt liÖu nghiªn cøu 7 gièng lóa nghiªn cøu lµ KS, LC93-4, CH207, CH5, LC93-1, CH7, C70 do ViÖn C©y l−¬ng thùc vµ thùc phÈm vµ ViÖn B¶o vÖ thùc vËt cung cÊp. Ph−¬ng ph¸p ph©n tÝch RAPD T¸ch chiÕt ADN tæng sè theo ph−¬ng ph¸p cña Gawel vµ cs (1991) [4]. Ph−¬ng ph¸p RAPD ®−îc thùc hiÖn theo m« t¶ cña Foolad vµ cs (1995). Ph¶n øng RAPD ®−îc thùc hiÖn trong 20 µl dung dÞch chøa 11,7 µl H2O + 2,0 µl buffer PCR + 2,0 µl MgCl2 (25mM) + 1,2 µl dNTP (2,5mM) + 1,6 µl primer (10mM) + 0,5 µl Taq-polymerase (5 unit/µl) + 1,0 µl ADN mÉu (10 ng/µl).