Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm nuôi cấy tăng sinh vi khuẩn tả trong môi trường cảm ứng sinh độc tố tả in vitro và tách chiết độc tố từ môi trường nuôi cấy làm nguyên liệu chế tạo kít phát hiện và antidote kháng độc tố tả. | TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2015 CẢM ỨNG VI KHUẨN TẢ SINH ĐỘC TỐ TARIN VITRO VÀ TÁCH CHIẾT ĐỘC TỐ TỪ MÔI TRƢỜNG NUÔI CẤY Hoàng Đắc Thăng*; Đỗ Minh Trung*; Phạm Thế Tài*; Lê Văn Đông* TÓM TẮT Mục tiêu: cảm ứng vi khuẩn tả (VKT) Vibrio cholerae sinh độc tố tả (ĐTT) in vitro và tách chiết độc tố từ môi trường nuôi cấy làm nguyên liệu chế tạo kít phát hiện ĐTT và antidote kháng ĐTT. Phương pháp: nuôi cấy tăng sinh đồng thời kích thích VKT sinh ĐTT in vitro trong môi trường cảm ứng có chứa pepton, cao men bia, NaCl và NaHCO3. Tách chiết ĐTT từ môi trường nuôi cấy bằng kỹ thuật kết tủa phân đoạn protein. Đánh giá hoạt tính của sản phẩm thu được bằng kỹ thuật GM1-ELISA và điện di SDS-PAGE. Kết quả: nuôi cấy in vitro VKT trong môi trường cảm ứng có sinh ĐTT, sản phẩm độc tố tách chiết được từ môi trường nuôi cấy có khả năng gắn đặc hiệu vào thụ thể GM1 và có kích thước tương ứng với các tiểu phần của ĐTT. Kết luận: đã nuôi cấy cảm ứng VKT sinh độc tố in vitro và tách chiết được ĐTT từ môi trường nuôi cấy. * Từ khóa: Độc tố tả; Vi khuẩn tả; Tách chiết độc tố. In Vitro Induction of Cholera Toxin Production and Extraction of Toxin from Culture Medium Summary Objective: Induction of cholera toxin (CT) in vitro production by Vibrio cholerae and extraction of CT from culture medium to be used as material for the development of CT detection kit and antidote. Methods: Bacterial proliferation and stimulation of toxin production were done by culturing of V. cholerae with the inducing medium which contained peptone, yeast extract, NaCl, NaHCO3. The toxin was extracted from culture medium by protein-precipitation fractionation method. Obtained toxin was determined by GM1-ELISA and SDS-PAGE techniques. Results: V. cholerae produced CT in vitro as being cultured in the inducing medium. The toxin extracted from culture medium bind specifically to GM1 receptor and has the size corresponding to CT subuits. Conclusion: CT has been successfully induced and extracted from in in vitro
