Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xây dựng và tối ưu hóa những điều kiện chủ yếu cho một hệ thống kít ELISA sử dụng lượng nọc rắn Hổ mang Naja atra trên in vitro. | TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2015 NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN BỘ KÍT ELISA ĐỊNH LƢỢNG NỌC RẮN HỔ MANG NAJA ATRA Hà Thị Hải*; Nguyễn Ngọc Tuấn**; Nguyễn Trung Nguyên*** Phùng Thế Hải**; Nguyễn Đặng Dũng** TÓM TẮT Mục tiêu: xây dựng bộ xét nghiệm ELISA định lượng nọc rắn Hổ mang miền Bắc Việt Nam (Naja atra). Đối tượng và phương pháp: bộ xét nghiệm ELISA sử dụng huyết thanh kháng nọc rắn đặc hiệu từ ngựa và thỏ; tiến hành tối ưu hóa các điều kiện phản ứng, xác định ngưỡng phát hiện và giới hạn định lượng của bộ xét nghiệm. Kết quả: ngưỡng phát hiện (LOD) của bộ xét nghiệm ELISA định lượng nọc rắn Hổ mang là 0,87 ng/ml, giới hạn định lượng (LOQ) là 1,27 ng/ml; bộ kít đạt yêu cầu về độ nhạy, độ ổn định và độ đúng. * Từ khóa: Nọc rắn; Naja atra; ELISA. Development of Quantitative ELISA Test Kit for the Detection of Chinese Cobra (Naja atra) Venom Summary Objective: To develop an ELISA test for venom quantitation in clinical samples of snakebite victims by Chinese cobra (Naja atra). Materials and methods: An ELISA testkit (developed using horse and rabbit sera specific to venom) was optimized for reaction conditions, as well as limit of detection (LoD), limit of quantitation (LoQ). Results: LoD and LoQ values of the test for were ng/ml and ng/ml, respectively; the test was primarily qualified for analytical sensitivity, reproducibility and accuracy. * Key words: Venom; Naja atra; ELISA. ĐẶT VẤN ĐỀ Với nạn nhân rắn độc cắn, việc đánh giá mức độ nhiễm độc có giá trị hỗ trợ cho việc theo dõi tiến triển bệnh nhân (BN), chỉ định điều trị bằng huyết thanh kháng nọc đặc hiệu và tiên lượng bệnh. Tuy nhiên, việc phân mức độ nhiễm độc đối với nạn nhân rắn độc cắn nói chung, với rắn Hổ mang nói riêng chủ yếu dựa vào kinh nghiệm lâm sàng của bác sỹ điều trị nạn nhân rắn độc cắn. Do vậy, có sự khác nhau giữa các trung tâm điều trị nạn nhận rắn độc cắn. Xét nghiệm xác định nọc rắn định tính và định lượng được xem là cơ sở khoa học khách quan, * §¹i .
