Bài viết có mục tiêu nhằm xây dựng quy trình đánh giá hoạt tính enzym 5α-reductase từ mô tuyến tiền liệt người để sàng lọc các thuốc có tác động điều trị phì đại tuyến tiền liệt lành tính. bài viết. | Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số 1 * 2018 XÂY DỰNG QUI TRÌNH Đ[NH GI[ HOẠT TÍNH ENZYM 5α-REDUCTASE TỪ MÔ TUYẾN TIỀN LIỆT NGƢỜI Trần Thủy Tiên*, Nguyễn Đức Toàn*, Trần Mạnh Hùng* TÓM TẮT Mục tiêu: Xây dựng qui trình đ{nh gi{ hoạt tính 5α-reductase in vitro từ mô tuyến tiền liệt người để sàng lọc các thuốc có t{c động điều trị PĐTTLLT. Đối tượng v| phương pháp nghiên cứu Mẫu thử nghiệm: Mẫu mô tuyến tiền liệt của bệnh nh}n PĐTTLLT được chỉ định phẩu thuật tại bệnh viện Bình Dân, Tp. HCM với đầy đủ hồ sơ bệnh án và sự đồng ý của bệnh nhân. Quy trình tạo dịch đồng thể chứa enzym 5α-reductase: Mô tuyến tiền liệt được đồng nhất hóa, ly tâm thu cắn. Hòa cắn với dịch bảo quản và tiếp tục nghiền đồng thể cho đến khi thu được dịch đồng nhất. Định lượng protein trong dịch đồng thể enzym bằng phương ph{p Bradford Định lượng testosteron bằng phương ph{p ELISA: Thực hiện theo hướng dẫn từ bộ Kit của công ty sản xuất DRG, Đức. Khảo s{t điều kiện thực hiện phản ứng khử testosteron thành dihydrotestosteron Các yếu tố như nồng độ testosteron, nồng độ NADPH, lượng protein enzym, pH và thời gian phản ứng được khảo s{t để chọn điều kiện phản ứng xảy ra với hoạt tính enzym cao. Kết quả: Qui trình tạo dịch đồng thể chứa 5α-reductase từ mô tuyến tiền liệt người xúc tác cho phản ứng chuyển testosteron thành dihydrotestosteron diễn tiến tốt ở pH = 5,5, lượng protein enzym tối thiểu 1,4 mg, nồng độ testosteron khoảng 16 ng/ml (55 nM), nồng độ NADPH: 0,15 mM, nhiệt độ ủ: 37 ºC và thời gian ủ: 60 phút. Finasterid ức chế mạnh 5α-reductase chiết từ tuyến tiền liệt người với IC50 là 10,87 nM. Kết luận: Qui trình tạo dịch đồng thể enzym 5α-reductase v| điều kiện phản ứng khử testosteron thành dihydrotestosteron có thể ứng dụng để sàng lọc thuốc có t{c động ức chế 5α-reductase. Từ khóa: Dịch đồng thể enzym, 5α-reductase, in vitro, finasterid ABSTRACT DEVELOPING AN IN VITRO PROCEDURE FOR EVALUATION OF 5α-REDUCTASE ACTIVITY FROM HUMAN PROSTATE TISSUE Tran Thuy Tien, .
