Mục tiêu nghiên cứu nhằm xây dựng quy trình tạo dịch đồng thể enzym HMG-CoA reductase từ gan chuột nhắt để áp dụng trong sàng lọc thuốc ức chế HMG-CoA reductase in vitro. . | Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số 1 * 2018 MÔ PHỎNG MÔ HÌNH THỬ T[C ĐỘNG ỨC CHẾ HMG-CoA REDUCTASE TỪ NGUỒN ENZYM Ở GAN CHUỘT NHẮT Trương Đ nh Phước*, Trần Thị Thiên Thanh*, Huỳnh Ngọc Trinh*, Trần Mạnh Hùng* TÓM TẮT Mục tiêu: Xây dựng quy trình tạo dịch đồng thể enzym HMG-CoA reductase từ gan chuột nhắt để áp dụng trong sàng lọc thuốc ức chế HMG-CoA reductase in vitro. Đối tượng v| phương ph{p nghiên cứu: Gan của chuột nhắt chủng Swiss albino, 8-10 tuần tuổi, giống đực, được chọn để tạo dịch đồng thể chứa HMG-CoA reductase. Định lượng protein trong dịch đồng thể enzym bằng phương ph{p pyrogallol-molybdat. X{c định hoạt tính HMG-CoA reductase trong dịch đồng thể enzym bằng phương ph{p đo động học sự giảm độ hấp thu của NADPH ở bước sóng 340 nm . Kết quả: Đã xây dựng được quy trình tạo dịch đồng thể enzym chứa HMG-CoA reductase từ gan chuột nhắt và x{c định được c{c điều kiện tối ưu của phản ứng khảo sát tác dụng ức chế HMG- CoA reductase in vitro, gồm: nồng độ cơ chất HMG- CoA ban đầu 60 M, nồng độ co-factor NADPH 0,02 mM, dithiothreitol 1 mM, nhiệt độ phản ứng 37oC, lượng protein enzym 1 mg, pH 7,5 (đệm Tris- HCl) và thời gian tiến hành phản ứng trong 5 phút. Atorvastatin cho hoạt tính ức chế HMG-CoA reductase thu được từ gan chuột nhắt với IC50 ước lượng là 14,89 ng/ml. Từ khóa: HMG-CoA reductase, gan, chuột nhắt, dịch đồng thể ABSTRACT DEVELOPING A PROCEDURE TO DETERMINE INHIBITION OF HMG-CoA REDUCTASE FROM MOUSE LIVER ENZYMES Truong Dinh Phuoc, Tran Thi Thien Thanh, Huynh Ngoc Trinh, Tran Manh Hung * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Supplement Vol. 22 - No 1- 2018: 340 - 347 Aim of study: This study aimed to develop a procedure to evaluate the inhibitory effect of new drug candidates on HMG-CoA reductase from mouse liver. Material and Method: Homogenate containing HMG-CoA reductase was prepared from 8-10 week old, male, Swiss albino mouse liver. Protein concentration in homogenate was determined by pyrogallol-molybdate method. HMG-CoA .
