Nghiên cứu nhằm mục tiêu trình bày bước đầu sử dụng so sánh với kỹ thuật real time PCR so sánh với nested PCR trong phát hiện và chẩn đoán loài plsamodium spp. Nghiên cứu sử dụng kỹ thuật giem sa trong sàng lọc bệnh nhân nhiễm KSTSR ở 2 xã Đak Ơ và xã Bù Gia Mập, huyện Bù Gia Mập, tỉnh Bình Phước. | Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013 BƯỚC ĐẦU SỬ DỤNG KỸ THUẬT REAL TIME PCR SO SÁNH VỚI KỸ THUẬT NESTED - PCR TRONG PHÁT HIỆN VÀ CHẨN ĐOÁN LOÀI PLASMODIUM SPP Phạm Nguyễn Thúy Vy*, Trịnh Ngọc Hải*, Hoàng Thị Mai Anh*, Nguyễn Thị Vân Anh*, Võ Thế Ngọc Bích*, Nguyễn Thị Minh Châu* TÓM TẮT Đặt vấn đề: Phát hiện Plasmodium spp bằng PCR đã tăng độ nhạy và phân biệt các loài, đặc biệt các ca nhiễm phối hợp chính xác hơn so với kính hiển vi hoặc miễn dịch. Tuy nhiên, hầu hết các phương pháp PCR được công bố hiện nay đều đọc kết quả trên gel agrose đòi hỏi kỹ thuật phức tạp chưa tối ưu trong điều trị lâm sàng. Gần đây đã áp dụng kỹ thuật Real Time PCR, có độ nhạy cao hơn và thời gian làm việc hiệu quả hơn dùng để chẩn đoán và phân biệt loài ký sinh trùng sốt rét. Mục tiêu: Bước đầu sử dụng so sánh với kỹ thuật Real Time PCR so sánh với Nested PCR trong phát hiện và chẩn đoán loài Plsamodium spp. Đối tượng và Phương pháp: Sử dụng kỹ thuật Giem sa trong sàng lọc bệnh nhân nhiễm KSTSR ở 2 xã Đak Ơ và xã Bù Gia Mập, huyện Bù Gia Mập, tỉnh Bình Phước, sau đó dùng Real time PCR so sánh với Neted PCR trong phát hiện loài. Kết quả: Trong 400 mẫu sàng lọc bằng kỹ thuật Giem sa chỉ phát hiện được 2 chủng và , Nested PCR và Real time PCR phát hiện thêm có chủng . Đối với mẫu kỹ thuật Nested PCR phát hiện là nhiễm phối hợp P. falciparum và thì kỹ thuật Real time PCR phát hiện thêm nhiễm phối hợp với cả P. vivax. Mẫu được xác định là âm tính với kỹ thuật Giemsa thì Nested PCR phát hiện là và Real time PCR lại phát hiện thêm nhiễm . Kết luận: Kỹ thuật Real time PCR có độ nhạy cao hơn Nested PCR tuy nhiên độ đặc hiệu chưa xác định được. Từ khóa: Real time PCR, Plasmodium spp, Nested PCR. ABSTRACT INITIAL USING REAL TIME PCR COMPARISON WITH NESTED PCR DETECTION AND DIAGNOSIS PLASMODIUM SPP Pham Nguyen Thuy Vy, Trinh Ngoc Hai, Hoang Thi Mai Anh, Nguyen Thi Van Anh, Vo Ngoc Bich, Nguyen Thi Minh
