Bài viết đặt vấn đề về các biệt dược mang bản chất là kháng thể kháng EGFR đã chứng tỏ được tính hiệu quả trong điều trị ung thư đại trực tràng, tuy nhiên chỉ một bộ phận bệnh nhân không mang đột biến gen kras mới đáp ứng tốt với dược phẩm này. Vì thế cần thiết phải xây dựng được xét nghiệm chẩn đoán chính xác trạng thái đột biến gen kras trên nhóm bệnh nhân có nhu cầu điều trị sử dụng biệt dược này. | Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 3 * 2013 Nghiên cứu Y học NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHẨN ĐOÁN ĐỘT BIẾN GEN KRAS BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR ĐẶC HIỆU ALLELE TÍCH HỢP CÔNG NGHỆ BẮT MỒI 2 ĐOẠN Ngô Tất Trung*, Trần Thị Thanh Huyền*, Lê Hữu Song* TÓM TẮT Đặt vấn đề: Các biệt dược mang bản chất là kháng thể kháng EGFR đã chứng tỏ được tính hiệu quả trong điều trị ung thư đại trực tràng, tuy nhiên chỉ một bộ phận bệnh nhân không mang đột biến gen Kras mới đáp ứng tốt với dược phẩm này. Vì thế cần thiết phải xây dựng được xét nghiệm chẩn đoán chính xác trạng thái đột biến gen Kras trên nhóm bệnh nhân có nhu cầu điều trị sử dụng biệt dược này. Vật liệu và phương pháp: các dòng tế bào và plasmid mang các điểm đột biến khác nhau của Kras, Sybrgreen I và các vật tư cần thiết cho phản ứng realtime PCR. Kết quả: Xét nghiệm realtime PCR đặc hiệu allele có tích hợp giải pháp công nghệ bắt mồi hai lần (dual – priming oligo –DPO) đã được xây dựng thành công, nó cho phép xác định các trạng thái đột biến khác nhau của gen Kras (34G>T, 34G>C, 34G>A, 35G>T, 35G>C, 35G>A, 38G>A) khi quần thể DNA mang đột biến chiếm ít nhất 1% DNA bệnh phẩm (kết quả này tương đương với Therascreen Kras mutation test kit do hãng DxS limited Manchester cung cấp). Đồng thời số xét nghiêm được giảm từ bảy (07) xuống còn ba (03) phản ứng vì thế tiết kiệm được chi phí xét nghiệm. Kết luận: quy trình chẩn đoán đột biến gen Kras đã được xây dựng thành công ABSTRACT SETTING UP A COST EFFECTIVE MOLECULAR DIAGNOSTIC TEST FOR KRAS GENE MUTATION WITH TECHNIQUE OF ALLENE SPECIFIC REAL TIME PCR COMBINED DUAL PAIRING OLIGOTIDS Ngo Tat Trung, Tran Thi Thanh Huyen, Le Huu Song * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ Supplement of No 3 ‐ 2013: 56 ‐ 62 Introduction: Monoclonal anti – epithelial growth factor receptor (EGFR) antibodies has gained FDA’s approval for colorectal cancer management, however, only those habouring wild
