Bài viết thiết lập phản ứng Sandwich - ELISA để phát hiện kháng nguyên lông của O157:H7 dựa trên kháng thể đa dòng chế qua thỏ và 02 kháng thể đơn dòng Mab, Mab đặc hiệu với kháng nguyên H7. Để nắm nội dung . | Thiết lập quy trình phản ứng Sandwich -ELISA phát hiện O157:H7 trong thịt bò Phạm Công Hoạt1, Lê Văn Nhương2 Tóm tắt: Với một kháng thể đa dòng chế qua thỏ và hai kháng thể đơn dòng Mab , Mab đặc hiệu với kháng nguyên lông đã thiết lập được phản ứng Sandwich-ELISA với các thông số: kháng thể đa dòng phủ đĩa: 12,5 µg/ml, kháng thể đơn dòng và : 1,25 µg/ml, tác nhân block đĩa: sữa tách bơ 5%, conjugate: pha loãng 1/1000. Khả năng phát hiện O157:H7 trong thịt bò của phản ứng Sandwich-ELISA là tương đương với phương pháp PCR-multiplex. Từ khoá: O157:H7, Phản ứng Sandwich –ELISA, Thịt bò Development a Sandwich-ELISA to apply for detecting E. coli O157:H7 in beef Pham Cong Hoat, Le Van Nhuong Summary: A rabbit anti-Escherichia coli O157: H7 polyclonal antibody and two monoclonal antibodies Mab, Mab specific for the H7 antigen have been used to develop a Sandwich-ELISA with the parameters: polyclonal antibody concentration , monoclonal antibodies and : , block agent 5% skim milk, conjugate dilution 1/1000. The ability to detect O157: H7 in beef by sandwich-ELISA is equivalent to multiplex PCR Keywords: O157:H7, Sandwich –ELISA, Beef I. Đặt vấn đề O157:H7 là vi khuẩn gây bệnh cho con người nhưng có nguồn gốc từ gia súc và các sản phẩm thực phẩm, vì vậy, phải có các hệ thống chẩn đoán, xác định vi khuẩn riêng cho người và động vật [3,4]. Về nguyên tắc chung, việc chẩn đoán, xác định vi khuẩn thường dựa trên 3 yếu tố: i) vi khuẩn trong mẫu bệnh phẩm hoặc thực phẩm; ii) kháng thể kháng O157 hoặc H7; iii) độc tố hoặc các gen độc tố. Trong bài báo này, chúng tôi thiết lập phản ứng Sandwich –ELISA để phát hiện kháng nguyên lông của O157:H7 dựa trên kháng thể đa dòng chế qua thỏ và 02 kháng thể đơn dòng Mab, Mab đặc hiệu với kháng nguyên H7 . II. Nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu Nguyên liệu: - Kháng thể đa dòng ( .
