The glycosylation of polypeptide chain is a post-translational process which depends on the type of cell in which the recombinant is synthesized and physical factors, such as culture conditions, and isolation procedures used in purification [3]. Therefore, the isoform profile of EPO decides biological activity of products and distinguish recombinant products from cell type. | Tạp chí phân tích Hóa, Lý và Sinh học - Tập 20, số 3/2015 SEPARATION OF RECOMBINANT ERYTHROPOIETIN ISOFORMS BY CAPILLARY ELECTROPHORESIS Đến tòa soạn 16 - 6 - 2015 Hoang Hanh Uyen, Nguyen Khac Manh, Nguyen Tien Giang, Nguyen Thi Xuan Mai, Nguyen Huy Du, Nguyen Anh Mai. Central Laboratory for Analysis - University of Science Ho Chi Minh City. TÓM TẮT PHÂN TÁCH CÁC DẠNG ISOFORM CỦA ERYTHROPOIETIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI MAO QUẢN Thành phần isoform của protein erythropoietin (EPO) tái tổ hợp dùng làm dược phẩm đã được nghiên cứu bằng kỹ thuật điện di mao quản (CE) với đầu dò UV. Quá trình phân tách các isoform EPO bằng CE được thực hiện trên cột silica sử dụng putrescine để biến tính bề mặt mao quản nhằm giảm sự hấp thụ protein EPO lên thành mao quản và tăng độ phân giải, dung dịch điện ly nền ngoài putrescine còn chứa urea, CH3COONa và tricine. Sau khi tối ưu các yếu tố như thành phần dung dịch điện ly nền, thông số của thiết bị CE quy trình có khả năng phân tách hoàn toàn 7 isoform có trong protein EPO với độ phân giải và độ lập lại cao. 1. INTRODUCTION Erythropoietin (EPO) is a glycoprotein hormone which stimulates erythropoiesis produced from the kidneys. Recombinant erythropoietin is available as a drug in the clinical treatment of anaemia. The carbohydrates content of roughly 40% of total molecular mass of EPO and polypeptide chain contains 4 glycosylation sites with 3 N-linked and 1 O-linked [1]. Each carbohydrate chains may contain 2-4 branches, and each branch may terminate with a sialic acid, thus EPO isoforms possess different numbers of sialic acid. 378 The biological activity of each isoform depends on the number of sialic acid residues [2]. The glycosylation of polypeptide chain is a post-translational process which depends on the type of cell in which the recombinant is synthesized and physical factors, such as culture conditions, and isolation procedures used in purification [3]. Therefore, the isoform profile of EPO decides biological activity of
