Tách chiết DNA theo quy trình chuẩn của Bộ môn Hóa sinh và Sinh học phân tử, Trường Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch, Thành phố Hồ Chí Minh từ máu người đạt kết quả tốt. Tối ưu hóa thành công phản ứng PCR khuếch đại trình tự gene HFE với độ chính xác 5 ng/µl. Xác định điểm đột biến C282Y tại vị trí nucleotide 845 trên trình tự gene HFE bằng kỹ thuật RFLP với enzyme cắt giới hạn RsaI. | TẠP CHÍ KHOA HỌC ĐẠI HỌC VĂN LANG Trương Thế Quang CHẨN ĐOÁN BỆNH THỪA SẮT BẰNG KỸ THUẬT RFLP DIAGNOSIS OF HEMOCHROMATOSIS BY RFLP TECHNIQUE TRƯƠNG THẾ QUANG TÓM TẮT: Tách chiết DNA theo quy trình chuẩn của Bộ môn Hóa sinh và Sinh học phân tử, Trường Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch, Thành phố Hồ Chí Minh từ máu người đạt kết quả tốt. Tối ưu hóa thành công phản ứng PCR khuếch đại trình tự gene HFE với độ chính xác 5 ng/µl. Xác định điểm đột biến C282Y tại vị trí nucleotide 845 trên trình tự gene HFE bằng kỹ thuật RFLP với enzyme cắt giới hạn RsaI. Xây dựng thường quy xét nghiệm chẩn đoán bệnh thừa sắt đột biến thể đồng hợp C282Y. Kết quả nghiên cứu là cơ sở khoa học trong nghiên cứu dịch tễ học và chẩn đoán bệnh thừa sắt ở người Việt Nam. Từ khóa: bệnh thừa sắt; gene HFE; điện di; kỹ thuật RFLP. ABSTRACT: DNA extraction according to the standard procedure of Biochemistry and Molecular Biology Department, Pham Ngoc Thach Medical University, Ho Chi Minh City from the samples of human blood has achieved good results. PCR reactions have been optimized successfully to amplify HFE gene sequence with the accuracy of 5 ng/μl. Position of C282Y mutation at nucleotide 845 of HFE gene sequence has been determined by RFLP technique with RsaI restriction enzyme. Diagnostic procedure for C282Y mutant hemochromatosis has been established. The results of research are scientific basis for research of epidemiology and diagnosis of hemochromatosis for Vietnamese people. Key words: Hemochromatosis; HFE gene; electrophoresis; RFLP technique. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ Sắt (Fe) là nguyên tố kim loại phổ biến trên trái đất. Ở người, sắt là một trong những chất dinh dưỡng vi lượng có vai trò quan trọng bậc nhất, sắt là thành phần quan trọng của hemoglobin, myoglobin và một số enzyme oxy hóa khử như catalase, peroxydase, các cytochrom. Gan là nơi dự trữ sắt chính trong cơ thể, chiếm 1/3 tổng lượng sắt dự trữ trong cơ thể. Trong điều kiện sinh lý, phần lớn sắt nằm trong tế bào gan, một lượng nhỏ
