Hàm lượng polyphenol quyết định đến màu sắc, độ chát và hương vị của nước chè, catechins và dẫn xuất của nó chiếm khoảng 70% polyphenol tổng số. Leucoanthocyanidin reductase (LAR) là một trong hai enzyme chìa khóa tham gia vào con đường sinh tổng hợp catechins ở chè. | Hoàng Thị Thu Yến và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 187(11): 129 - 135 BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA LEUCOANTHOCYANIDIN REDUCTASE PHÂN LẬP TỪ CHÈ TRUNG DU XANH (Camellia sinensis var. macrophylla) TRONG VI KHUẨN E. COLI Hoàng Thị Thu Yến1*, Huỳnh Thị Thu Huệ2 1 Trường Đại học Khoa học - ĐH Thái Nguyên, Viện Nghiên cứu hệ gen - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2 TÓM TẮT Hàm lượng polyphenol quyết định đến màu sắc, độ chát và hương vị của nước chè, catechins và dẫn xuất của nó chiếm khoảng 70% polyphenol tổng số. Leucoanthocyanidin reductase (LAR) là một trong hai enzyme chìa khóa tham gia vào con đường sinh tổng hợp catechins ở chè. Gen mã hóa LAR có 3 locus trên hệ gen (CsLAR1, CsLAR2, CsLAR3) trong đó CsLAR1 được chứng minh tham gia sinh tổng hợp catechin và gallocatechin từ leucoanthocyanidin. Chè Trung du từ lâu đã được coi là khởi thủy của cây chè Việt Nam, có 2 dòng chính là Trung du xanh và Trung du tím. Gen CsLAR1 được phân lập từ chè Trung du xanh có một số khác biệt về trình tự amino acid so với các trình tự đã công bố, một số sai khác nằm trong các vùng quy định chức năng của CsLAR1. Nghiên cứu này trình bày kết quả tạo CsLAR1 tái tổ hợp. Gen CsLAR1 được gắn vào vecotor biểu hiện pET32a(+), sau đó biến nạp vào vi khuẩn E. coli chủng Rosetta, sử dụng IPTG cảm ứng biểu hiện CsLAR1 tái tổ hợp. CsLAR1 thu được tồn tại ở cả dạng không tan và dạng tan. Từ khóa: chè Trung du, chè Trung du xanh, Leucoanthocyanidin reductase, catechins, catechin, gallocatechin, CsLAR1 MỞ ĐẦU* Chất lượng sản phẩm chè được đánh giá chủ yếu dựa trên thành phần hóa học có trong chè. Theo thống kê của Harbowy (1997) [5], thành phần hóa học chính trong chất rắn chiết xuất từ chè xanh là polyphenol, chiếm 30-40% khối lượng, tiếp theo là các hợp chất chứa N có khoảng 15% bao gồm caffein (khoảng 25%), protein (6%) và các amino acid (5%). Điều đặc biệt là ngoài các amino acid phổ biến, theanine là amino acid chỉ có ở trong chè chiếm đến 3%. Thành phần hydratcacbon ở chè có khoảng
