Bài viết trình bày tách chiết và làm sạch RNaza từ nọc rắn hổ mang để nhận chế phẩm Enzim có độ sạch cao, phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo về tương tác RNara nọc rắn với RI là rất cần thiết. | Kết quả tách Enzim Ribonuclea từ nọc rắn hổ mang bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion trên cột Cm-xen-lu-lô 28(3): 83-87 T¹p chÝ Sinh häc 9-2006 KÕt qu¶ t¸ch enzim ribonucleaza tõ näc r¾n hæ mang b»ng ph−¬ng ph¸p s¾c ký trao ®æi ion trªn cét CM-xen-lu-l« NguyÔn V¨n ThiÕt, Giang Th¸i S¬n ViÖn C«ng nghÖ sinh häc C¸c nghiªn cøu tr−íc ®©y cña chóng t«i ®· cacb«xymethylxenlul« (CM-xen-lu-l«) cña h·ng cho thÊy enzim ribonucleaza (RNaza) trong näc Sigma. Glyxin (Gly) cña h·ng Prolabo. C¸c hãa r¾n hæ mang Naja atra (Cantor, 1842) ViÖt Nam chÊt kh¸c ®Òu cã ®é s¹ch ph©n tÝch cao. thÓ hiÖn ho¹t tÝnh xóc t¸c cao nhÊt trong vïng Ph©n t¸ch RNaza b»ng ph−¬ng ph¸p s¾c ký axit [7, 8], víi pH tèi −u (pHopt) t−¬ng ®−¬ng víi trao ®æi ion trªn cét (∅1,6 × 12-15 cm) CM- pHopt cña pepsin [1] trong d¹ dµy cña ng−êi vµ xen-lu-l«. Trong mçi lÇn s¾c ký cho lªn cét (®· c¸c ®éng vËt bËc cao kh¸c: pHopt = 2,53 ± 0,30 ®−îc c©n b»ng tr−íc víi ®Öm xitrat 10 mM cã [8]; trong khi RNaza trong näc r¾n hæ mang Naja gi¸ trÞ pH kh¸c nhau lµ 5,8; 5,6; 5,5; 5,2; 4,8 vµ oxiana vïng Trung ¸ [10], RNaza trong näc r¾n 4,4) kho¶ng 100 mg näc r¾n ®«ng kh« (10 ml hæ mang Naja naja vïng Guntur cña Ên §é [4] chÕ phÈm Eo), röa cét b»ng mét thÓ tÝch ®Öm vµ tÊt c¶ c¸c enzim kh¸c thuéc siªu hä RNaza A ban ®Çu, sau ®ã th«i protein ra khái cét b»ng (bao gåm tÊt c¶ c¸c RNaza ngo¹i tiÕt ë ®éng vËt gradient nång ®é NaCl 0 ÷ 1,0 M NaCl víi thÓ cã x−¬ng sèng, trõ líp C¸) [5] ®Òu cã pHopt > 7. tÝch chung lµ 120 ml (b×nh chøa: 60 ml NaCl 1 H¬n n÷a, nh÷ng kÕt qu¶ nghiªn cøu b−íc ®Çu cña M trong ®Öm xitrat 10 mM; b×nh khuÊy: 60 ml chóng t«i cho thÊy RNaza trong näc r¾n hæ mang ®Öm xitrat 10 mM), tèc ®é ch¶y 1 ml/phót, thu ViÖt Nam kh«ng bÞ øc chÕ bëi protein øc chÕ mçi ph©n ®o¹n 3 ml. Sau khi kÕt thóc c«ng viÖc RNaza (RI) tõ nhau thai ng−êi [11]. §iÒu nµy cã s¾c ký, ho¹t tÝnh cña RNaza trong mçi ph©n nghÜa lµ RNaza trong näc r¾n hæ mang kh«ng ®o¹n ®−îc x¸c ®Þnh theo ph−¬ng ph¸p
