Bài viết nghiên cứu tính bền nhiệt của Enzim; kết quả phân tách RNaza bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion; kết quả phân tách RNaza bằng phương pháp sắc ký sàng lọc phân tử; sự phụ thuộc hoạt tính của RNaza từ nọc rắn hổ mang chúa vào pH. | Kết quả nghiên cứu Ribonucleaza trong nọc rắn hổ mang chúa (Ophiophagus Hannah) 29(4): 86-92 T¹p chÝ Sinh häc 12-2007 kÕt qu¶ nghiªn cøu ribonucleaza trong näc r¾n hæ mang chóa (ophiophagus hannah) NguyÔn V¨n ThiÕt ViÖn C«ng nghÖ sinh häc Ribonucleaza (RNaza) lµ nhãm enzim cã h−íng lµm thuèc chèng virus vµ ®iÒu trÞ ung th−. ph©n bè rÊt réng r·i vµ ®−îc nghiªn cøu rÊt nhiÒu, v× vËy ngoµi nh÷ng chøc n¨ng sinh häc I. ph−¬ng ph¸p Nghiªn cøu th«ng th−êng cña c¸c RNaza lµ tham gia vµo trao ®æi chÊt cña c¸c acid nucleic, ngµy nay Näc r¾n hæ mang chóa ®«ng kh« ®−îc mua ë chóng ta ®· biÕt ®−îc rÊt nhiÒu tÝnh chÊt (hay lµng nghÒ nu«i r¾n x· Vinh S¬n, huyÖn VÜnh chøc n¨ng) sinh häc míi cña c¸c enzim thuéc T−êng, tØnh VÜnh Phóc. RNA toµn phÇn tõ nÊm nhãm RNaza nh− ho¹t tÝnh kh¸ng khuÈn [1, 2], men (Sigma) ®−îc sö dông lµm c¬ chÊt cho kh¸ng virus [10, 11], ho¹t tÝnh g©y ®éc tÕ bµo RNaza. RNaza näc r¾n hæ mang chóa ®−îc ph©n (hay ho¹t tÝnh cytotoxin) [4, 5], ho¹t tÝnh øc chÕ t¸ch b»ng c¸c ph−¬ng ph¸p s¾c ký trao ®æi ion vµ ph¶n øng miÔn dÞch [4] §Æc biÖt lµ vai trß cña sµng läc ph©n tö trªn cét víi c¸c chÊt mang kh¸c nucleaza, trong ®ã cã RNaza trong phßng thñ vµ nhau, qu¸ tr×nh ®−îc thùc hiÖn trªn thiÕt bÞ FPLC. tù vÖ cña c¬ thÓ ®−îc b¶o tån tõ vi sinh vËt cho CM-xenlul« (CMC) cña h·ng Sigma, SP ®Õn c¸c c¬ thÓ bËc cao nh− ng−êi [3, 6, 12]. Tuy Sepharose 4 Fast Flow (SP), Superdex 75 (S-75) nhiªn RNaza tõ näc r¾n nãi chung cßn Ýt ®−îc vµ Superdex 200 (S-200) do Phßng thÝ nghiÖm nghiªn cøu. Cho ®Õn nay míi chØ cã RNaza tõ träng ®iÓm C«ng nghÖ gen t¹i ViÖn C«ng nghÖ näc r¾n hæ mang cña Ên §é lµ nhËn ®−îc ë sinh häc cung cÊp. X¸c ®Þnh protein b»ng ph−¬ng d¹ng cã ®é s¹ch cao [7], cßn RNaza tõ näc r¾n ph¸p quang phæ. Ho¹t tÝnh RNaza ®−îc ®o theo cña c¸c loµi kh¸c míi chØ ®−îc lµm s¹ch mét ph−¬ng ph¸p nh− ®· m« t¶ tr−íc ®©y [8] vµ biÓu phÇn. Mét sè nghiªn cøu vÒ RNaza cña chóng diÔn b»ng ®¬n vÞ OD260. t«i trong thêi gian gÇn ®©y cho .