Bài viết nghiên cứu phân lập và xác định trình tự gien mã hóa Protein vỏ của virut PVY ở khoai tây được trồng ở Thái Nguyên nhằm phục vụ cho việc tạo giống khoai tây chuyển gien kháng lại virut đã công bố. | Phân lập và xác định trình tự gien mã hóa Protein vỏ của virut Y ở khoai tây trồng tại Thái Nguyên 32(1): 81-87 T¹p chÝ Sinh häc 3-2010 PH¢N LËP Vµ X¸C §ÞNH TR×NH Tù GIEN M HãA PR«TªIN Vá CñA VIRót Y ë KHOAI T¢Y TRåNG T¹I TH¸I NGUY£N NGUYÔN THÞ T¢M Tr−êng ®¹i häc S− ph¹m, ®¹i häc Th¸i Nguyªn CHU HOµNG MËU §¹i häc Th¸i Nguyªn NGUYÔN Vò THANH THANH Tr−êng ®¹i häc Khoa häc, ®¹i häc Th¸i Nguyªn Khoai t©y (Solanum tuberosum L.) lµ c©y ®Òu t−¬ng ®ång cao víi tr×nh tù ®' c«ng bè trªn l−¬ng thùc ®−îc trång réng r'i trªn thÕ giíi. Ng©n hµng gien NCBI. Virót X (Potato virus X - PVX), virót Y (Potato virus Y - PVY), virót g©y xo¨n l¸ (Potato leaf I. PH¦¥NG PH¸P NGHI£N CøU roll virus - PLRV), virót A (Potato virus A - PVA), virót M (Potato virus M - PVM), virót S 1. VËt liÖu (Potato virus S - PVS). g©y ra c¸c bÖnh xo¾n Hai mÉu l¸ khoai t©y bÞ nhiÔm bÖnh thu tõ lïn, kh¶m l¸ vµ cuèn l¸ lµ c¸c virót g©y bÖnh huyÖn Phó B×nh tØnh Th¸i Nguyªn ®−îc kÝ hiÖu trªn khoai t©y ë ViÖt Nam. V× thÕ c©y sinh ThaiNguyen1 vµ ThaiNguyen2. tr−ëng chËm, sè l−îng vµ khèi l−îng cñ bÞ gi¶m ®¸ng kÓ, do vËy n¨ng suÊt bÞ gi¶m râ rÖt. ë ViÖt C¸c lo¹i hãa chÊt, dông cô vµ thiÕt bÞ phôc Nam, bÖnh virót cã ë kh¾p c¸c vïng trång khoai vô cho thÝ nghiÖm sinh häc ph©n tö. t©y, phæ biÕn g©y h¹i nÆng lµ virót X vµ Y [1, 2]. 2. Ph−¬ng ph¸p PVY lµ Potyvirus thuéc hä Potyviridae víi ARN tæng sè ®−îc t¸ch chiÕt theo h−íng hÖ gien chøa ARN sîi ®¬n, kÝch th−íc kho¶ng dÉn sö dông hãa chÊt Trizol Reagent cña h'ng 9,7kb. PVY g©y bÖnh nghiªm träng trªn khoai Invitrogen (Mü). t©y, thuèc l¸, cµ chua vµ mét sè c©y trång thuéc hä Cµ. PVY cã 5 nhãm kh¸c nhau, ®ã lµ: PVYO, Tæng hîp cADN theo bé kit First stand PVYN, PVYNTN, PVYNWi vµ PVYC. PVY gåm cDNA synthesis cña h'ng Fermentas. c¸c protein sau: P1, HC (Helper Component), P3, Nh©n gien CP b»ng kü thuËt PCR. PCR ®−îc CI (Cylindrical Inclusion), Nia (Nuclear tiÕn hµnh víi tæng thÓ tÝch ph¶n øng 25 µl gåm: Inclusion A)
