Bài viết trình bày nuôi cấy tạo thể phôi PLB; nuôi cấy tạo dịch huyền phù mô sẹo phôi hóa; nuôi cấy tăng sinh tế bào mô sẹo phôi hóa; ảnh hưởng của mô nuôi cấy đến tái sinh mô sẹo phôi hóa. | Nhân nhanh hoa hoàng lan bằng kỹ thuật nuôi cấy phôi soma 33(4): 72-78 T¹p chÝ Sinh häc 12-2011 NH¢N NHANH HOA Hoµng LAN B»NG Kü THUËT NU¤I CÊY PH¤I SOMA Bïi ThÞ T−êng Thu, TrÇn V¨n Minh ViÖn Sinh häc nhiÖt ®íi Vi nh©n gièng truyÒn thèng trªn loµi hoa lan M«i tr−êng dinh d−ìng kho¸ng c¬ b¶n ®−îc hiÖn nay dÉn ®Õn mét vÊn ®Ò mµ c¸c phßng thÝ sö dông trong nu«i cÊy lµ MS (Murashige &. nghiÖm vi nh©n gièng th−êng gÆp ph¶i ®ã lµ tèn Skoog, 1962) [6]. Cã bæ sung: BA (6- nhiÒu chi phÝ lao ®éng ®Ó s¶n xuÊt c©y con víi benzylaminopurine), TDZ (thidiazuron), kinetin khèi l−îng lín, khi ®−a ra thÞ tr−êng gi¸ thµnh (6-furfurylaminopurine), IAA (β-indolacetic c©y con l¹i cao [7]. HÖ thèng nh©n gièng b»ng acid), IBA (β-indolacetic acid), NAA (α- ph«i v« tÝnh [2] sÏ gi¶i quyÕt ®−îc rµo c¶n nªu napthalene acetic acid), B1 (5 mg/l), n−íc dõa, trªn víi c¸c lîi thÕ: nh©n nhanh d−íi d¹ng tÕ ®−êng sucrose (30 g/l). bµo, ph«i v« tÝnh lµ mét thÓ biÖt hãa cã hÖ sè t¸i §iÒu kiÖn nu«i cÊy: nhiÖt ®é phßng 26 ± sinh cao, tèn Ýt chi phÝ lao ®éng vµ gi¸ thµnh h¹ 2oC, RH = 65%, thêi gian chiÕu s¸ng 10 [4]. VËt liÖu khëi ®Çu lµ thÓ ph«i gi¶ (PLB) vµ bÑ l¸ non in vitro trong nu«i cÊy ph«i v« tÝnh cã giê/ngµy, c−êng ®é chiÕu s¸ng 33,3 µmol/m2/s, vai trß ®¶m b¶o ®−îc ®Æc ®iÓm di truyÒn bè mÑ tèc ®é l¾c 100 rpm. vµ duy tr× hÖ sè t¸i sinh cao trong thêi gian dµi ThiÕt kÕ thÝ nghiÖm: bè trÝ theo khèi ®Çy ®ñ [9]. M«i tr−êng nu«i cÊy ph«i v« tÝnh thÝch hîp ngÉu nhiªn, 3 lÇn lËp l¹i, mçi lÇn lËp l¹i nu«i chiÕm vai trß quan träng trong qu¸ tr×nh sinh cÊy 3 b×nh tam gi¸c (chøa 60 ml m«i tr−êng b¸n tr−ëng vµ biÖt hãa tÕ bµo ph«i [1]. §iÒu khiÓn r¾n hay 50 ml m«i tr−êng láng). Sè liÖu ®−îc qu¸ tr×nh biÖt hãa vµ t¸i sinh ph«i v« tÝnh d−íi ph©n tÝch b»ng phÇm mÒm MSTATC (t = 0,05). t¸c ®éng cña c¸c chÊt ®iÒu hßa sinh tr−ëng BA, kinetin, TDZ, NAA ®V trë thµnh quy luËt [3]. II. KÕT QU¶ Vµ TH¶O LUËN PLB lµ mét thÓ ®a ph«i ph«i ®Æc biÖt ph¸t sinh trong nu«i cÊy
