Vi khuẩn Escherichia coli O157:H7 là nguyên nhân quan trọng gây nên các vụ ngộ độc thực phẩm và gây chết người trên toàn thế giới. Một kỹ thuật phát hiện nhanh và chính xác là rất quan trọng. Shiga toxin 2 (mã hóa bởi gen stx2) là một tác nhân quan trọng gây của dòng STEC nói chung và E. coli O157:H7 nói riêng, do vậy gen st2 là một trong những gen đích cho rất nhiều các kỹ thuật phát hiện sử dụng. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã phát triển kỹ thuật LAMP để phát hiện nhanh và chính xác chủng vi khuẩn Escherichia coli O157:H7. Kỹ thuật này có ưu điểm là phát hiện nhanh, chính xác và thiết bị đơn giản. Bộ mồi được thiết kế đặc biệt dựa trên trình tự gen stx2. Chúng tôi nhận thấy không có sự khác nhau khi sử dụng duy nhất mồi trong (BIP/FIP) hoặc cả 4 mồi. Phản ứng dương tính được quan sát bằng mắt thường khi sử dụng SYBR green hoặc dưới tia UV. | Phát triển kỹ thuật Lamp (Loop-Mediated Isothermal Amplification) cho việc phát hiện nhanh và chính xác vi khuẩn Escherichia coli O157: H7 TẠP CHÍ SINH HỌC, 2012, 34(3): 343-346 PHÁT TRIỂN KỸ THUẬT LAMP (LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION) CHO VIỆC PHÁT HIỆN NHANH VÀ CHÍNH XÁC VI KHUẨN Escherichia coli O157: H7 Hoàng Phú Hiệp1, Lê Quang Huấn2* (1) Đại học Sư phạm Thái Nguyên (2*) Viện Công nghệ sinh học, huanlequang@ TÓM TẮT: Vi khuẩn Escherichia coli O157:H7 là nguyên nhân quan trọng gây nên các vụ ngộ độc thực phẩm và gây chết người trên toàn thế giới. Một kỹ thuật phát hiện nhanh và chính xác là rất quan trọng. Shiga toxin 2 (mã hóa bởi gen stx2) là một tác nhân quan trọng gây của dòng STEC nói chung và E. coli O157:H7 nói riêng, do vậy gen st2 là một trong những gen đích cho rất nhiều các kỹ thuật phát hiện sử dụng. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã phát triển kỹ thuật LAMP để phát hiện nhanh và chính xác chủng vi khuẩn Escherichia coli O157:H7. Kỹ thuật này có ưu điểm là phát hiện nhanh, chính xác và thiết bị đơn giản. Bộ mồi được thiết kế đặc biệt dựa trên trình tự gen stx2. Chúng tôi nhận thấy không có sự khác nhau khi sử dụng duy nhất mồi trong (BIP/FIP) hoặc cả 4 mồi. Phản ứng dương tính được quan sát bằng mắt thường khi sử dụng SYBR green hoặc dưới tia UV. Từ khóa: Escherichia coli O157: H7, LAMP, stx2 gen, FIP, BIP. MỞ ĐẦU trong điều kiệu đẳng nhiệt vì vậy, chỉ cần sử Escherichia coli O157:H7 (E. coli dụng các thiết bị giữ nhiệt như bể ổn nhiệt, tủ O157:H7) thuộc nhóm vi khuẩn tạo độc tố ấm. Hơn nữa, thành phần phản ứng có thể bảo Shiga (Shiga toxin-producing Escherichia coli, tồn trong một tháng khi giữ ở nhiệt độ 37oC tốt STEC). Vi khuẩn E. coli O157:H7 là một trong hơn đề xuất của nhà sản xuất [7]. Với những ưu những nguyên nhân chính nên các vụ ngộ độc điểm đó, kỹ thuật LAMP trở thành kỹ thuật thực phẩm và một số bệnh ở người như: tiêu được sử dụng rộng rãi trong các phương
