Bài viết tiến hành chuyển đoạn gen mã hóa cho protein interleukin-7 (IL-7) đã được nhân dòng vào vector pRTRA để tạo cassette 35S-IL7-cMyc-histag-100xELP; sau đó ghép nối vào vector chuyển gen pCB301 và biến nạp vào vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. | Biểu hiện tạm thời Protein interleuki-7 tái tổ hợp trong cây thuốc lá (Nicotiana benthamiana Domin) bằng phương pháp Agro-infiltration TAPBiểu CHIhiện SINHtạmHOC 2017, 39(2): thời protein 219-225 interleukin-7 DOI: BIỂU HIỆN TẠM THỜI PROTEIN INTERLEUKIN-7 TÁI TỔ HỢP TRONG CÂY THUỐC LÁ (Nicotiana benthamiana Domin) BẰNG PHƯƠNG PHÁP AGRO-INFILTRATION Nguyễn Huy Hoàng1,2, Phạm Bích Ngọc1, Lê Văn Sơn1, Chu Hoàng Hà1* 1 Viện Công nghệ Sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học & Công nghệ Việt Nam 2 Trường Đại học Y Dược Thái Nguyên, Đại học Thái Nguyên TÓM TẮT: Interleukin-7 là một cytokine có vai trò quan trọng trong việc thúc đấy sự sinh trưởng và phát triển của các tế bào miễn dịch CD4 và CD8 trong hệ miễn dịch của người, đây cũng là đích tấn công của mầm bệnh khi xâm nhập cơ thể. Trong nghiên cứu này, chúng tôi tiến hành chuyển đoạn gen mã hóa cho protein interleukin-7 (IL-7) đã được nhân dòng vào vector pRTRA để tạo cassette 35S-IL7-cMyc-histag-100xELP; sau đó ghép nối vào vector chuyển gen pCB301 và biến nạp vào vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. Cấu trúc này được biến nạp vào lá cây thuốc lá Nicotiana benthamiana bằng phương pháp agro-infiltration. Kết quả kiểm tra protein tách chiết từ mẫu lá bằng lai miễn dịch sau 5 ngày biến nạp cho thấy đã biểu hiện thành công protein IL-7 tái tổ hợp ở lá thuốc lá. Tuy nhiên, có sự sai khác về khối lượng phân tử protein IL-7 so với tính toán lý thuyết do có hiện tượng glycosyl hóa trong quá trình biến đổi sau dịch mã. Phân tích hàm lượng protein IL-7 tái tổ hợp bằng phần mềm ImageJ trên màng lai sau khi tinh sạch protein từ 1 kg lá tươi bằng phương pháp sắc ký ion cố định kim loại thu được hàm lượng protein IL-7 chiếm 3,15% protein tổng số. Kết quả này tạo tiền đề cho các nghiên cứu thu nhận protein IL-7 tái tổ hợp an toàn ở thực vật, ứng dụng trong việc chữa bệnh cho con người. Từ khóa: Nicotiana benthamiana, biểu hiện tạm thời,
