Cải thiện mức độ biểu hiện protein tái tổ hợp LTB của Escherichia Coli trong tế bào khả biến Escherichia Coli BL21 (DE3)

Nghiên cứu này nhằm cải thiện mức độ biểu hiện protein tái tổ hợp LTB trong tế bào E. coli chủng BL21 (DE3) mang gen eltB của vi khuẩn E. coli. | Cải thiện mức độ biểu hiện protein tái tổ hợp LTB của Escherichia Coli trong tế bào khả biến Escherichia Coli BL21 (DE3) KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXV SỐ 3 - 2018 CAÛI THIEÄN MÖÙC ÑOÄ BIEÅU HIEÄN PROTEIN TAÙI TOÅ HÔÏP LTB CUÛA ESCHERICHIA COLI TRONG TEÁ BAØO KHAÛ BIEÁN ESCHERICHIA COLI BL21 (DE3) Đinh Thị Bích Lân1, Phùng Thăng Long2, Đặng Thanh Long , Lê Công Thịnh1, Lê Đức Thạo1, Lê Quốc Việt1, 1 Nguyễn Thị Bình1, Đặng Thị Hương1, Huỳnh Văn Chương1, Lê Viết Quân1 TÓM TẮT Nghiên cứu này nhằm cải thiện mức độ biểu hiện protein tái tổ hợp LTB trong tế bào E. coli chủng BL21 (DE3) mang gen eltB của vi khuẩn E. coli. Kết quả nghiên cứu cho thấy môi trường nuôi cấy TB và YJ cho khả năng sinh trưởng tốt nhất của vi khuẩn E. coli với tỷ lệ tiếp giống là 2% (OD600 = 0,8), lắc 200 vòng/phút ở nhiệt độ 37ºC sau 9 giờ nuôi cấy. Mức độ biểu hiện của protein dung hợp 6xHis-LTB cho kết quả tốt nhất trên môi trường YJ và HSG trong cùng điều kiện tối ưu (nồng độ chất cảm ứng Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) 1,2 mM, lắc 200 vòng/phút, nhiệt độ cảm ứng 25ºC - 35ºC trong thời gian 8 giờ). Sắc ký lọc gel 6xHis cho sản phẩm protein dung hợp 6xHis-LTB có khối lượng phân tử khoảng 35 kDa. Từ khóa: protein dung hợp, LTB, độc tố, E. coli Enhancing expression of recombinant protein LTB of Escherichia coli in competent cells, Escherichia coli BL21 (DE3) Dinh Thi Bich Lan, Phung Thang Long,, Dang Thanh Long, Le Công Thinh, Le Duc Thao, Le Quoc Viet, Nguyen Thi Binh , Dang Thi Huong, Huynh Van Chuong, Le Viet Quan SUMMARY The study on improvement of the recombinant protein LTB expression level in E. coli strain BL21 (DE3) encoding gene eltB of E. coli was conducted. The studied results showed that TB and YJ media have given the best growth of E. coli BL21 (DE3) in comparison with other media in the same 2 % initial seed inoculum size (OD600 = ), shaking 200 rpm at 370C for 9 hours. The highest level