Bài viết thiết lập phương pháp xác định đột biến gen Jak2 V617F và CARL bằng cách phối hợp công nghệ PCR đặc hiệu hai hướng allele tích hợp công nghệ ARMS. Đối tượng và phương pháp: 64 bệnh phẩm máu ngoại vi thu thập từ các bệnh nhân có hội chứng tăng sản tủy, 02 mẫu chứng dương mang đột biến Jak2 V617F và 01 mẫu chứng mang đột biến CARL. Các mẫu chứng dương được pha vào mẫu ADN chân tóc người khỏe mạnh với các tỷ lệ giảm dần: 100, 50, 25, 5, 0,5 và 0% sau đó sử dụng DSA-PCR-ARMS để phát hiện xác định độ nhạy kỹ thuật và giải trình tự gene để xác định độ đặc hiệu của phương pháp. | PCR đặc hiệu Allele tích hợp công nghệ Amplification Refractory Mutation System DSA-PCRARMS phát hiện đột biến JAK2 V617F và Carl trên bệnh nhân có hội chứng tăng sản tủy PCR ĐẶC HIỆU ALLELE TÍCH HỢP CÔNG NGHỆ AMPLIFICATION REFRACTORY MUTATION SYSTEM DSA-PCR- ARMS PHÁT HIỆN ĐỘT BIẾN JAK2 V617F VÀ CARL TRÊN BỆNH NHÂN CÓ HỘI CHỨNG TĂNG SẢN TỦY Ngô Tất Trung1 Đào Thanh Quyên1 Phan Quốc Hoàn1 Lê Hữu Song1 DOI TÓM TẮT Đặt vấn đề Đột biến gen Jak2V617F và CARL được xác định là những dấu ấn có giá trị trong chẩn đoán hội chứng tăng sản tủy. Mục tiêu Thiết lập phương pháp xác định đột biến gen Jak2 V617F và CARL bằng cách phối hợp công nghệ PCR đặc hiệu hai hướng allele tích hợp công nghệ ARMS. Đối tượng và phương pháp 64 bệnh phẩm máu ngoại vi thu thập từ các bệnh nhân có hội chứng tăng sản tủy 02 mẫu chứng dương mang đột biến Jak2 V617F và 01 mẫu chứng mang đột biến CARL. Các mẫu chứng dương được pha vào mẫu ADN chân tóc người khỏe mạnh với các tỷ lệ giảm dần 100 50 25 5 0 5 và 0 sau đó sử dụng DSA-PCR-ARMS để phát hiện xác định độ nhạy kỹ thuật và giải trình tự gene để xác định độ đặc hiệu của phương pháp. Kết quả Ngưỡng phát hiện Jak2V617F là 0 5 tế bào ung thư trong tổng số tế bào xét nghiệm độ đặc hiệu là 100 sau khi giải trình tự gene. Đột biến gen Jak2 V617F xảy ra ở 32 50 64 các thể điển hình của hội chứng tăng sản tủy. Trong khi đó có 2 17 bệnh nhân tăng tiểu cầu nguyên phát và 1 13 bệnh nhân xơ tuỷ có mang gene CARL đột biến. Kết luận Phương pháp DSA-PCR-ARMS để phát hiện đột biến gene Jak2 V617F và CARL đã được xây dựng thành công và tỷ lệ các đột biến này ở bệnh nhân Việt Nam bước đầu đã được xác định. Từ khóa Jak2 V617F CARL hội chứng tăng sản tủy MPN ABSTRACT BIDIRECTIONAL ALLELE SPECIFIC PCR INTEGRATED WITH AMPLIFICATION REFRACTORY MUTATION SYSTEM DSA-PCR-ARMS FOR ANALYZING CARL AND JAK2 V617F MUTATIONS IN PATIENTS WITH MYELOPROLIFERATIVE NEOPLASM Ngo Tat Trung1 Dao Thanh Quyen1 Phan Quoc Hoan1 Le Huu Song1 Bachground Jak2 V617F
