Bài viết trình bày biểu hiện protein EDIII tái tổ hợp của 4 típ huyết thanh của virus Dengue (DENV) trên Escherichia coli (). Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu là các plasmid tái tổ hợp pGEX-2T mang gene EDIII của mỗi típ huyết thanh của DENV. | Nghiên cứu biểu hiện kháng nguyên vỏ miền III tái tổ hợp của virus sốt xuất huyết type 1 2 3 4 trên Escherichia coli Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế - Tập 9 số 6 7 tháng 12 2019 Nghiên cứu biểu hiện kháng nguyên vỏ miền III tái tổ hợp của virus sốt xuất huyết type 1 2 3 4 trên Escherichia coli Trần Thanh Loan1 Đặng Ngọc Phước2 Nguyễn Ngọc Lương3 Phan Thị Minh Phương1 Alberto Alberti4 1 Bộ môn Miễn dịch Sinh lý bệnh Trường Đại học Y Dược Đại học Huế 2 Bộ môn Sinh hóa Trường Đại học Y Dược Đại học Huế 3 Bộ môn Công nghệ sinh học Khoa Sinh học - Trường Đại học Khoa học Huế 4 . Bộ môn Vi sinh và Miễn dịch học - Thú y Đại học Sassari - Ý Tóm tắt Mục tiêu Biểu hiện protein EDIII tái tổ hợp của 4 típ huyết thanh của virus Dengue DENV trên Escherichia coli . Đối tượng và phương pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu là các plasmid tái tổ hợp pGEX-2T mang gene EDIII của mỗi típ huyết thanh của DENV. Sau khi tạo dòng thành công chúng tôi tiến hành cho plasmid pGEX-2T-EDIII tái tổ hợp biến nạp vào chủng Escherichia coli BL21 DE3 RIPL để biểu hiện protein EDIII tái tổ hợp trong những điều kiện nhiệt độ và nồng độ IPTG khác nhau. Kỹ thuật Western blot được sử dụng để kiểm tra sự biểu hiện chính xác cũng như tính kháng nguyên của protein EDIII của DENV típ 2. Kết quả Kết quả phân tích SDS-PAGE cho thấy protein EDIII tái tổ hợp của 4 típ huyết thanh của DENV đều đã được tạo dòng và biểu hiện thành công trên Escherichia coli. Nhiều điều kiện biểu hiện khác nhau đã được kiểm tra nhưng không tạo được protein EDIII tái tổ hợp ở dạng hòa tan. Kết quả phân tích Western blot cho thấy protein EDIII của DENV-2 đã được biểu hiện chính xác và xác nhận tính kháng nguyên của nó. Kết luận Protein EDIII tái tổ hợp của 4 típ huyết thanh của virus Dengue DENV đã được biểu hiện thành công trên Escherichia coli . Tinh sạch protein EDIII không hòa tan bằng quá trình biến tính rồi hồi tính có thể mang lại kết quả trong những nghiên cứu tiếp theo. Từ khóa virus Dengue DENV
