Hệ thống CRISPR/Cas9 là một trong những công cụ đem lại hiệu quả chỉnh sửa gen cao và có triển vọng trong ứng dụng lâm sàng. Với mục tiêu chỉnh sửa gen RAPTOR và Atg5 trên dòng tế bào bạch cầu mạn tính dòng tủy K562 và tế bào ung thư não TGS04 bằng hệ thống CRISPR/Cas9. | TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC NGHIÊN CỨU CHỈNH SỬA GEN BẰNG HỆ THỐNG CRISPR CAS9 TRONG DÒNG TẾ BÀO UNG THƯ Vũ Thị Hà1 2 Bùi Tường An1 Đoàn Thị Kim Phượng1 2 1 Trường Đại học Y Hà Nội 2Bệnh viện Đại học Y Hà Nội Hệ thống CRISPR Cas9 là một trong những công cụ đem lại hiệu quả chỉnh sửa gen cao và có triển vọng trong ứng dụng lâm sàng. Với mục tiêu chỉnh sửa gen RAPTOR và Atg5 trên dòng tế bào bạch cầu mạn tính dòng tủy K562 và tế bào ung thư não TGS04 bằng hệ thống CRISPR Cas9 chúng tôi thiết kế hệ thống CRISPR Cas9 bằng cách chèn đoạn trình tự đích vào plasmid PX330. Plasmid này được đưa vào tế bào đích bằng xung điện. Để đánh giá hiệu quả của quá trình chỉnh sửa gen chúng tôi sử dụng các kỹ thuật PCR giải trình tự gen và Western blotting. Kết quả cho thấy CRISPR Cas9 được thiết kế đã gây xóa exon3 trên gen RAPTOR gây đột biến mất đoạn gen Atg5 dẫn đến tăng rõ rệt mức độ biểu hiện của protein LC3I và giảm đáng kể mức độ biểu hiện của protein LC3II. Nghiên cứu của chúng tôi đã chỉ ra rằng hệ thống CRISPR Cas9 chỉnh sửa được các gen đích dẫn đến sự biến đổi protein và các sản phẩm trong con đường hoạt hóa gen. Từ khóa CRISPR Cas9 liệu pháp gen tế bào ung thư. I. ĐẶT VẤN ĐỀ CRISPR Cas9 được viết tắt từ những đệm spacer trên DNA đích mới xâm nhập và chữ cái đầu của cụm Clustered Regularly giúp protein Cas CRISPR-associated nhận Interspaced Short Palindromic Repeats và ra và thực hiện cắt đứt sửa chữa sợi DNA tại CRISPR-associated Cas protein là một hệ vùng bắt cặp. Kết quả là DNA có thể được sửa miễn dịch ở sinh vật nhân sơ giúp chúng có khả đổi nhanh hơn và dễ dàng hơn nhiều so với khả năng ghi nhớ và tạo miễn dịch với các yếu tố di năng sử dụng các phương pháp chỉnh sửa gen truyền ngoại lai. Trình tự CRISPR lần đầu tiên trước 2 Trên thế giới nhiều nghiên cứu đã được nhà khoa học Nhật Bản Yoshizumi Ishino sử dụng hệ thống này để sửa chữa DNA của bộ và cộng sự tìm ra vào năm 1987 trên E. coli và gen trên một số dòng tế bào ung thư hoặc trên nhiều vi khuẩn khác sau đó.
