Nghiên cứu này tập trung vào việc tối ưu hóa quá trình phân tích 05 chất thuộc nhóm HMOs gồm Glc, Gal, GlcNAc, Fuc và Neu5Ac trên thiết bị LC-MS/MS. Trong đó, các dung môi chiết và một số bước làm sạch được khảo sát để loại bỏ tối đa ảnh hưởng của nền mẫu đến quá trình phân tích. Các điều kiện phân tích được tối ưu hóa tự động trên thiết bị LC-MS/MS để thu được dữ liệu về mảnh phổ phân tích. Phương pháp sẽ được thẩm định để xác nhận giá trị sử dụng và được áp dụng thử nghiệm thực tế để phân tích các mẫu TPBS thu mua trên thị trường. | Nghiên cứu khoa học Xây dựng và thẩm định phương pháp phân tích hàm lượng một số oligosaccharide từ sữa mẹ HMOs trong thực phẩm bổ sung bằng kỹ thuật sắc ký lỏng khối phổ LC-MS MS Nguyễn Thị Hồng Ngọc1 Mạc Thị Thanh Hoa1 Trần Hùng Sơn1 Ngô Mạnh Dũng2 Cao Công Khánh1 Vũ Thị Thanh An1 Phạm Thị Thanh Hà2 Lê Thị Hồng Hảo1 1 Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia Hà Nội Việt Nam 2 Trường Đại học Dược Hà Nội Việt Nam Ngày đến tòa soạn 25 12 2020 Ngày chấp nhận đăng 19 3 2021 Tóm tắt Kỹ thuật sắc ký lỏng khối phổ hai lần đã được ứng dụng nhằm nghiên cứu xây dựng và thẩm định phương pháp xác định hàm lượng một số oligosaccharide chính từ sữa mẹ Human Milk Oligosaccharides - HMOs gồm 2 -Fucosyllactose 2 -FL Lacto-N-neotetraose LNnT Lacto-N-tetraose LNT 3 -Siallylactose 3 -SL và 6 -Siallylactose 6 -SL trong thực phẩm bổ sung dạng bột và dạng lỏng. Hệ pha động sử dụng gồm 2 kênh kênh A dung dịch acid formic 0 1 và kênh B acetonitril kết nối với cột phân tích HILIC 1 7 μm 2 1 150 mm thông qua detector khối phổ cho thời gian phân tích ngắn trong 10 phút có thể xác định đồng thời được cả 05 chất thuộc nhóm HMOs. Phương pháp đã được thẩm định cho thấy độ chính xác cao nhanh hiệu quả và đã được áp dụng vào phân tích các mẫu trên thị trường cho thấy khả năng ứng dụng cao trong thực tế. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng cho cả 5 chất 2 -FL LNnT LNT 3 -SL 6 -SL tương ứng là 4 0 mg kg và 10 0 mg kg. Khoảng tuyến tính của phương pháp nằm trong khoảng từ 0 4 - 40 Mg mL. Các thông số thẩm định khác bao gồm độ đúng R 98 8 - 103 độ chính xác RSD 1 69 - 5 54 đều đáp ứng được theo yêu cầu của AOAC. Quy trình được áp dụng vào thực tế phân tích 25 mẫu thực phẩm bổ sung TPBS trên thị trường cho kết quả tổng các HMOs trong mẫu TPBS dạng bột khoảng 0 1 - 0 3 g 100g và đối với TPBS dạng lỏng khoảng 0 01 - 0 03 g 100mL. Từ khóa 2 -Fucosyllactose 2 -FL Lacto-N-neotetraose LNnT Lacto-N-tetraose LNT 3 -Siallylactose 3 -SL 6 -Siallylactose 6 -SL HMOs Thực phẩm bổ sung HPLC LC-MS .
