"Bài giảng Đột biến gen Beta-globin ở bệnh nhi Beta-thalassemia miền bắc Việt Nam" trình bày về nghiên cứu tiến cứu, mô tả, phân tích, cắt ngang, bằng các kỹ thuật lâm sàng và xét nghiệm; phát hiện đột biến gen tại Khoa Sinh học phân tử, bệnh nhi Beta-thalassemia. | ĐỘT BIẾN GEN BETA-GLOBIN Ở BỆNH NHI BETA-THALASSEMIA MIỀN BẮC VIỆT NAM Nguyễn Hoàng Nam Dương Bá Trực Bệnh viện Nhi trung ương 1 HNNKTQ TpHCM 30 11-1 12-18 ĐẶT VẤN ĐỀ Beta-thalassemia là bệnh di truyền phổ biến ở Việt Nam do giảm hay không tổng hợp được mạch beta globin của Hb do đột biến gen beta-globin. Nghiên cứu về đột biến gen beta-globin gây beta- thalassemia giúp ích cho việc tư vấn di truyền chẩn đoán trước sinh. Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu một số đặc điểm đột biến gen beta-globin ở bệnh nhân beta-thalassemia phía bắc Việt Nam 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Đối tượng nghiên cứu 104 bệnh nhân đủ tiêu chuẩn chẩn đoán 55 là beta- thalassemia 49 là beta-thalassemia HbE vào Bệnh viện Nhi trung ương. Tuổi - Dưới 5 tuổi 89 85 6 trong đó lt 1 tuổi 50 44 4 - Từ 5-10 tuổi 12 11 5 - Từ 10-15 tuổi 3 2 9 Giới Nam Nữ 59 45 1 3 1 Dân tộc - Kinh 71 68 3 - Ít người gồm Thái Tày Mường Nùng Sán Dìu Dao Bố Y 33 31 7 . Địa phương Hà Nội và 28 tỉnh thành miền bắc. 3 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu tiến cứu mô tả phân tích cắt ngang. bằng các kỹ thuật lâm sàng và xét nghiệm tại BVNTƯ Phát hiện đột biến gen tại Khoa Sinh học phân tử BVNTƯ - Tách DNA từ máu ngoại biên với bộ kít QIA gen DNA của Đức. - Sử dụng kỹ thuật Multiplex ARMS-PCR phát hiện 9 đột biến điểm thường gặp ở Châu Á là CD41 42 CD17 IVS1-1 -28 IVS2-654 CD71 72 IVS1-5 CD95 CD26 HbE . - Giải trình tự gen khi không thấy đột biến với Multiplex ARMS-PCR - Sử dụng kỹ thuật GAP-PCR để phát hiện đột biến xóa đoạn nếu cần. 4 Sơ đồ quy trình phát hiện đột biến gen β-globin Bệnh nhân β-thalassemia Thu thập mẫu máu và tách DNA Phát hiện đột biến gen bằng Multiplex PCR và ARMS-PCR Có đột biến gen Không thấy đột biến gen Xác định kiểu gen đột biến Giải trình tự gen Dị hợp tử đồng hợp tử Có đột biến gen Phát hiện đột biến xóa đoạn bằng GAP- PCR Một số đột biến gen -globin phát hiện bằng kỹ thuật ARMS 1 2 3 4 5 6 7 8 Nội kiểm 654 -28 17 Nội kiểm 43 71-72 Panel 1 1-6 Panel 2 7-8 1 Dị hợp tử -28 7 Di hợp tử IVS 2-654 2 Dị hợp tử kép
