Xác định genotýp của virus đang lnu hành giúp cho việc điều tra dịch tễ học, góp phần vào kiểm soát việc lấy lan và du nhập của dịch sởi. Kỹ thuật RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) hay còn gọi là phương pháp đa hình độ dài đoạn cắt giới hạn là một trong những kỹ thuật sinh học phân tử có độ nhạy cao, cho phép xác định nhanh chóng genotýp của virus sởi. Đề tài nghiên cứu nhắm: Xác định genotýp virus sởi hiện đang lưu hành ở một số tính miền Bắc - Việt Nam bằng phương pháp PCR-RFLP. | Ứ N G D ỤN G Q U Y TR ÌN H P C R -R F LP X Á C ĐỊNH G E N O T Ý P VIRUS SỞI PH ÂN LẬ P ĐƯ C Ở M Ộ T SÓ TỈN H M IÈN B Ắ C V IỆ T N A M sv. Tổng Bức Minh s v . Trần T hị M inh H ằng s v . N gô C hí Công s v . Đ ễ Trung Kiên H ưởng dẫn P G S Nguyễn Thái S n TÓ M TẲ T Trong những năm gần đây mặc dù vaccine sởi đã được đưa vào chương tr nh tiêm chủng mở rộng bệnh sởi vẫn bùng phát và diễn biến phức tạp ờ một số địa phương. Xác định genotýp của virus đang lưu hành giúp cho việc điều tra dịch tễ học góp phần vào kiểm soát việc lây lan và du nhập của dịch sởi. Kỹ thuật RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism hay còn gọi là phương pháp đa h nh độ đài đoạn cắt giới hạn là một trong những kỹ thuật sinh học phân íử có độ nhạy cao cho phép xác định nhanh chóng genotýp của virus sời. Nghiên cứu nhằm Xác định g notỷp virus sởi hiện đang lưu hành ở một s tinh miền Bắc - Việt Nam bằng phư ng pháp PCR-RFLP. Đổi tirựng và phương pháp nghiên cún 46 chủng virus sdi hoang dại thu ổuọc từ một số vụ dịch sỏi từ năm 2006 đến năm 2013 tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam đang được lưu giữ tại Khoa virus Viện Vệ sinh Dịch íễ TW. Sử dụng chủng chuẩn được phân lập từ 3 loại vacxin sống giảm độc lực gồm W6675 Rouvax Aventis Pasteur Pháp AIK C vero và MMR Mỹ và chủng genotýp H 1 là MVC 9 Genbank JF 824649 ỉàm đối chứng. Các chùng virus sau khi được phân lập và tách chiết ARN được khuếch đại đoạn gen N đặc hiệu tạo sản phẩm ADN có kích thước 660 bp tiếp tục chạy nested PCR để có sản phẩm 492 bp và tiến hành cắt bằng 3 enzym giới hạn Mboỉ HaelII ScrFI so sánh giữa các chủng nghiên cứu vởi chủng đối chứng để xác định genotýp. Đoạn gen N đặc hiệu của virus sởi cũng đuợc tiến hành giải tr nh tự kiểm chửng kết quả của PCR RFLP. Kết quả 46 chủng virus hoang đại thu thập trong giai đoạn 2006 2013 khi nhân gen bằng RT PCR và nested PCR đều cho kết quà dương tính với band ADN đặc hiệu kích thước tương ứng 660 bp và 492 bp tương tự kết quả nhân gen 3 chủng sởi vaccine và ỉ chủng sời
