Nghiên cứu này nhằm xây dựng quy trình PCR đa mồi để phân tích kiểu gen của rs1501299 trên gen ADIPQ ở người Việt Nam. Đối tượng và phương pháp: Các mẫu ADN người Việt Nam được sử dụng làm mẫu thử nghiệm. Sử dụng các phần mềm tin sinh thiết kế 4 mồi theo nguyên lý của kỹ thuật CTPP (contronting two-pair primers) để đưa vào trong một phản ứng PCR. | T p chÝ y d îc häc qu n sù sè 6-2021 XÂY DỰNG QUY TRÌNH PCR ĐA MỒI PHÂN TÍCH KIỂU GEN CỦA ĐA HÌNH rs1501299 GEN ADIPOQ Ở NGƯỜI VIỆT NAM Trần Quang Thuyên1 2 Đinh Hồng Dương2 Trần Quang Bình3 TÓM TẮT Mục tiêu Nghiên cứu này nhằm xây dựng quy trình PCR đa mồi để phân tích kiểu gen của rs1501299 trên gen ADIPQ ở người Việt Nam. Đối tượng và phương pháp Các mẫu ADN người Việt Nam được sử dụng làm mẫu thử nghiệm. Sử dụng các phần mềm tin sinh thiết kế 4 mồi theo nguyên lý của kỹ thuật CTPP contronting two-pair primers để đưa vào trong một phản ứng PCR. Tối ưu hóa nhiệt độ bắt cặp để xác định chu trình nhiệt thích hợp. Sử dụng phương pháp giải trình tự gen Sanger để kiểm chứng kết quả của quy trình. Kết quả Xây dựng thành công quy trình PCR với 4 mồi cho cùng một phản ứng để phát hiện kiểu gen của rs1501299 với kết quả nhanh và chính xác. Kết luận Kết quả nghiên cứu này có thể sử dụng trên quy mô lớn hơn để xác định tỷ lệ kiểu gen và phân tích mối liên quan giữa đa hình rs1501299 trên gen ADIPOQ với hội chứng chuyển hóa ở người Việt Nam. Từ khóa rs1501299 gen ADIPOQ CTPP-PCR. A Multiplex PCR Assay for Genotyping ADIPOQ Rs1501299 Polymorphism in Vietnamese People Summary Objectives To develop a multiplex PCR assay for the detection of rs1501299 polymorphism in Vietnamese people. Subjects and methods DNA samples from a group of Vietnamese people were used to evaluate this assay. Some bioinformatics software was used to design four primers for a multiplex PCR. The optimal melting temperature of primers was identified in proper thermal cycling. The Sanger sequencing method was used to confirm the results of this assay. Results The multiplex PCR protocol with four primers successfully identified ADIPOQ rs1501299 polymorphism rapidly and accurately. Conclusion The multiplex PCR protocol should be applied to genotyping rs1501299 polymorphism in a large population to investigate the association between this polymorphism and metabolic syndrome in the Vietnamese people. Keywords
