Đột biến rtA194T trên vùng gen mã hóa cho enzym RTase của HBV được chứng minh có liên quan đến tình trạng kháng thuốc Tenofovir disoproxil fumarate (TDF) trong điều trị viêm gan B mạn tính. Nghiên cứu xây dựng thành công kỹ thuật real-time COLD-PCR sử dụng TaqMan LNA probe có độ nhạy cao với tỷ lệ 0,1% đột biến/thể dại (mt/wt) để phát hiện sớm đột biến rtA194T ở bệnh nhân viêm gan B điều trị TDF. | TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC XÂY DỰNG KỸ THUẬT REAL-TIME COLD-PCR CÓ ĐỘ NHẠY CAO ĐỂ PHÁT HIỆN ĐỘT BIẾN RTA194T KHÁNG THUỐC TENOFOVIR ĐIỀU TRỊ VIÊM GAN B Chu Văn Sơn Lê Thị Ngân Vũ Thiên Sơn Phạm Thị Hạnh1 Nguyễn Minh Hằng Nguyễn Văn Dũng Vũ Bích Thảo Nguyễn Phạm Anh Hoa Phùng Thị Bích Thuỷ và Nguyễn Thị Vân Anh 1 Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quốc gia Hà Nội Bệnh viện Nhi Trung Ương Bệnh viện Bạch Mai Đột biến rtA194T trên vùng gen mã hóa cho enzym RTase của HBV được chứng minh có liên quan đến tình trạng kháng thuốc Tenofovir disoproxil fumarate TDF trong điều trị viêm gan B mạn tính. Trong nghiên cứu này chúng tôi đã xây dựng thành công kỹ thuật real-time COLD-PCR sử dụng TaqMan LNA probe có độ nhạy cao với tỷ lệ 0 1 đột biến thể dại mt wt để phát hiện sớm đột biến rtA194T ở bệnh nhân viêm gan B điều trị TDF. Kỹ thuật sau đó đã được thử nghiệm để phát hiện đột biến rtA194T trên 75 mẫu huyết thanh bệnh nhân viêm gan B mạn tính đã và đang điều trị với TDF và kết quả là chúng tôi không ghi nhận trường hợp bệnh nhân nào mang đột biến rtA194T. Kết luận lại kỹ thuật real-time COLD-PCR sử dụng TaqMan LNA probe có độ nhạy cao 0 1 mt wt với thời gian thực hiện nhanh trong vòng 3 giờ có tiềm năng ứng dụng trong việc sàng lọc sớm đột biến rtA194T liên quan tới kháng thuốc TDF để tư vấn và theo dõi hiệu quả việc điều trị thuốc TDF cho bệnh nhân viêm gan B trong tương lai. Từ khóa HBV rtA194T real-time COLD-PCR TaqMan LNA probe Tenofovir disoproxil fumarate TDF I. ĐẶT VẤN ĐỀ Tenofovir disoproxil fumarate TDF là thuốc có liên quan đến tình trạng kháng thuốc TDF. Phát kháng virus mạnh được sử dụng phổ biến nhất trên triển một kỹ thuật có độ nhạy cao giúp sàng lọc hay toàn thế giới trong điều trị viêm gan B mạn tính. phát hiện sớm đột biến xuất hiện trong quá trình Mặc dù TDF có hàng rào kháng thuốc cao tuy điều trị thuốc giúp bác sĩ lâm sàng có hướng xử trí nhiên gần đây một số nghiên cứu trên thế giới đã tiếp theo phù hợp 7 Trong công bố gần đây cho thấy bắt đầu
