Trong bài báo này, đưa ra quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất có kích thước 60 bp, hỗ trợ cho các thang chuẩn thương mại 50 bp. Đoạn DNA 60 bp có vị trí nhận biết của EcoRI ở hai đầu 5’ và 3’ được tổng hợp nhân tạo bằng PCR, tự nối với nhau nhờ T4 DNA ligase và được tách dòng tạo plasmid pSY-60. Cắt không hoàn toàn pSY-60 với enzyme giới hạn EcoRI tạo nên thang chuẩn SY60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất 60 bp, bước nhảy giữa 2 băng là 60 bp. | Tạp chí Công nghệ Sinh học 19 3 539-545 2020 XÂY DỰNG THANG CHUẨN DNA ĐỂ XÁC ĐỊNH CÁC BĂNG DNA KÍCH THƯỚC NHỎ Võ Thị Thương Lan Lê Thị Thanh Trường Đại học Khoa học tự nhiên Đại học Quốc gia Hà Nội Người chịu trách nhiệm liên lạc. E-mail vothithuonglan@ Ngày nhận bài Ngày nhận đăng TÓM TẮT Thang chuẩn DNA được sử dụng thường quy trong các phòng thí nghiệm xét nghiệm về sinh học phân tử. Bên cạnh nguồn thang chuẩn do các hãng thương mại cung cấp các thang chuẩn được nhiều phòng thí nghiệm chủ động tạo ra home-made DNA ladders . Trong bài báo này chúng tôi đưa ra quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 gồm 7 băng băng nhỏ nhất có kích thước 60 bp hỗ trợ cho các thang chuẩn thương mại 50 bp. Đoạn DNA 60 bp có vị trí nhận biết của EcoRI ở hai đầu 5 và 3 được tổng hợp nhân tạo bằng PCR tự nối với nhau nhờ T4 DNA ligase và được tách dòng tạo plasmid pSY-60. Cắt không hoàn toàn pSY-60 với enzyme giới hạn EcoRI tạo nên thang chuẩn SY- 60 gồm 7 băng băng nhỏ nhất 60 bp bước nhảy giữa 2 băng là 60 bp. Quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 đơn giản chi phí thấp thích hợp cho việc xác định kích thước nhỏ của các đoạn DNA cDNA khuếch đại bởi phản ứng PCR. Từ khóa cắt không hoàn toàn với enzyme giới hạn DNA lặp plasmid tái tổ hợp thang chuẩn DNA thương mại thang chuẩn SY- 60 bp MỞ ĐẦU giới hạn tạo thành hỗn hợp các đoạn DNA có kích thước xác định Parker et al. 1977 Thang chuẩn DNA là hỗn hợp các phân tử Cooney 1994 Polyarush et al. 2003 . Vì sử DNA có kích thước khác nhau được sử dụng dụng nguồn DNA sẵn có nên kích thước các trong điện di nhằm đánh giá kích thước và nồng băng tạo ra cũng như bước nhảy giữa các băng độ đoạn DNA chưa biết. Vì vậy trong nghiên không theo ý muốn mà phụ thuộc vào các vị trí cứu sinh học phân tử thang chuẩn DNA không sẵn có của enzyme giới hạn và kích thước của thể thiếu trong hầu hết các kỹ thuật từ đơn giản phân tử DNA ban đầu. Khác với DNA marker như điện di xác định kích thước sản phẩm DNA DNA ladder gồm tập hợp
