rong nghiên cứu này, trình tự ORF mã số [denovogenes] 32768 mã hóa cho β-glucosidase được khai thác từ dữ liệu DNA metagenome suối nước nóng Bình Châu được lựa chọn để biểu hiện trong vector pET17b do có độ tương đồng amino acid thấp với các enzyme trong GenBank, có chỉ số kiềm tính và Tm cao. | Tạp chí Công nghệ Sinh học 17 3 545-551 2019 NÂNG CAO HIỆU QUẢ BIỂU HIỆN β-GLUCOSIDASE TÁI TỔ HỢP TỪ TRÌNH TỰ GEN TRONG CƠ SỞ DỮ LIỆU METAGENOMIC SUỐI NƯỚC NÓNG BÌNH CHÂU Trần Thanh Thủy Lại Thị Hồng Nhung Lê Thị Thanh Xuân Nguyễn Kim Thoa Viện Công nghệ sinh học Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam Người chịu trách nhiệm liên lạc. E-mail nkthoa@ Ngày nhận bài Ngày nhận đăng TÓM TẮT Sản phẩm trao đổi chất của các vi sinh vật trong các hệ sinh thái địa nhiệt thường có tính chất đặc biệt giúp cho vi sinh vật có thể tồn tại sinh trưởng và phát triển trong môi trường cực trị. Để khai thác nguồn gen vi sinh vật từ các hệ sinh thái đặc biệt này cần phải có cách tiếp cận mới mà không thông qua nuôi cấy. Cùng với sự phát triển của kỹ thuật metagenomic theo hướng giải trình tự gen thế hệ mới và các phần mềm tin sinh học các nhà nghiên cứu đã dần dần tiếp cận được với các gen mới của vi sinh vật trực tiếp từ hệ gen môi trường. Trong nghiên cứu này trình tự ORF mã số denovogenes 32768 mã hóa cho β-glucosidase được khai thác từ dữ liệu DNA metagenome suối nước nóng Bình Châu được lựa chọn để biểu hiện trong vector pET17b do có độ tương đồng amino acid thấp với các enzyme trong GenBank có chỉ số kiềm tính và Tm cao. Nhằm nâng cao hiệu quả biểu hiện một số điều kiện chủng chủ môi trường nồng độ IPTG độ thông khí. cũng đã được khảo sát. Kết quả cho thấy chủng E. coli C43 DE3 tái tổ hợp đạt lượng sinh khối khô cực đại 8 26 g L biểu hiện hoạt tính β- glucosidase tốt nhất 0 34 U mL sau 42-48 giờ nuôi cấy ở nhiệt độ 30ºC trên môi trường TB trong điều kiện lắc với thể tích dịch nuôi cấy chiếm 20 thể tích bình nuôi nồng độ IPTG cảm ứng là 0 25mM. Kết quả nghiên cứu này không chỉ góp phần khẳng định hiệu quả của việc khai thác trực tiếp gen mới mã hóa cho các enzyme từ DNA metagenome vi sinh vật suối nước nóng Việt Nam mà còn là cơ sở để nghiên cứu và sản xuất các enzyme tái tổ hợp đáp ứng nhu cầu chuyển hóa sinh khối. Từ khóa Biểu hiện gen DNA .
