Bài giảng Công nghệ sinh học - Chuyên đề 1: Các phương pháp nghiên cứu enzyme cung cấp cho học viên những kiến thức về các phương pháp xác định hoạt độ enzyme: phương pháp phân tích liên tục, phương pháp phân tích gián đoạn; các phương pháp tách chiết và tinh sạch enzyme; phương pháp đo độ nhớt; . Mời các bạn cùng tham khảo chi tiết nội dung bài giảng! | Chuyên đề 1 CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ENZYME TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh 1 học NỘI DUNG . Các phƣơng pháp xác định hoạt độ enzyme . Các phƣơng pháp tách chiết và tinh sạch enzyme TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh học 2 . CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HOẠT ĐỘ ENZYME TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh 3 học NGUYÊN TẮC S còn lại P tạo thành Có thể xác định được hoạt độ enzyme nghiên cứu Cả S và P TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh học 4 CÁC PHƢƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HOẠT ĐỘ ENZYME Hai phương pháp - Phương pháp phân tích liên tục đo cơ chất bị biến đổi hay sản phẩm tạo thành một cách liên tục theo thời gian Ứng dụng khi không có chất hay cách làm ngưng phản ứng tức thì. Khó áp dụng - Phương pháp phân tích gián đoạn cho E tác dụng với S sau khoảng t nhất định thì làm ngưng phản ứng Ứng dụng rất phổ biến tác nhân ngưng phản ứng nhiệt độ cao thay đổi pH dùng chất bất hoạt enzyme TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh 5 học PHƢƠNG PHÁP ĐO ĐỘ NHỚT Yêu cầu độ nhớt của S phải lớn hơn nhiều so với P Chất có M lớn thì độ nhớt càng cao AN protein cellulose Nhớt kế Brookfield - USA TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh 6 học PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ KẾ UV-vis Biorad Yêu cầu S P có khả năng hấp thụ ánh sáng phân cực ở các xác định Điều quan trọng là xác định được của P hoặc S Ví dụ NADH 340nm Phosphoenolpyruvat PEP 240 nm Aa 260-280 nm . TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh học 7 PHƯƠNG PHÁP CHUẨN ĐỘ Yêu cầu pứ E có sự hình thành acid hoặc base Áp dụng xác định hoạt độ lipase Ưu điểm độ chính xác cao METTLER TOLEDO T70 TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh 8 học PHƯƠNG PHÁP HÓA HỌC Yêu cầu P là các chất màu có độ hấp thụ ánh sáng cực đại ở vùng nào đó Áp dụng xđ hoạt độ enzyme - amylase Kiểm tra mức độ nấu malt bia TS. Bùi Xuân Đông - Bộ môn Công nghệ sinh 9 học PHƯƠNG PHÁP HUZNH QUANG Áp dụng Khi các phương pháp thông thường không xác định được Cơ sở dựa trên sự hình thành các bức xạ của các chất đồng vị phóng xạ gắn vào S tại .
