Acinetobacter baumannii là một trong những tác nhân gây nhiễm khuẩn bệnh viện nguy hiểm hàng đầu hiện nay. Đặc biệt, các chủng A. baumannii sở hữu một số nhóm gene blaOXA, có khả năng biểu hiện tính đa kháng kháng sinh, nhất là đối với carbapenem. Mục đích: Nghiên cứu nhằm xây dựng quy trình Taq-Man real-time PCR phát hiện một số nhóm gene blaOXA-23, blaOXA-51 và blaOXA-58 điển hình ở A. baumannii. | Bản tin Khoa học Trẻ số 2 1 2016 77 XÂY DỰNG QUY TRÌNH TAQ-MAN REAL-TIME PCR PHÁT HIỆN MỘT SỐ NHÓM GENE blaOXA Ở ACINETOBACTER BAUMANNII Nguyễn Tuấn Anh1 Huỳnh Minh Tuấn2 Nguyễn Kim Huyền2 Nguyễn Vũ Hoàng Yến2 Trịnh Thị Thoa2 Huỳnh Kim Ngân2 Võ Thị Tuyết Nga2 Nguyễn Văn Vĩnh Châu3 Hồ Huỳnh Thùy Dương14 1 Công ty TNHH Công nghệ Sinh học Khoa Thương 2 Khoa Kiểm soát Nhiễm khuẩn Bệnh viện Đại học Y Dược 3 Bệnh viện Bệnh Nhiệt đới 4 Bộ môn Di truyền Đại học Khoa học Tự nhiên TP. Hồ Chí Minh Nguyễn Tuấn Anh Email ntanhbio@ TÓM TẮT Tổng quan Acinetobacter baumannii là một trong những tác nhân gây nhiễm khuẩn bệnh viện nguy hiểm hàng đầu hiện nay. Đặc biệt các chủng A. baumannii sở hữu một số nhóm gene bla OXA có khả năng biểu hiện tính đa kháng kháng sinh nhất là đối với carbapenem. Mục đích Nghiên cứu nhằm xây dựng quy trình Taq-Man real-time PCR phát hiện một số nhóm gene blaOXA-23 blaOXA-51 và blaOXA-58 điển hình ở A. baumannii. Phương pháp Quy trình sử dụng các mẫu dò Taq-Man được thiết kế đặc trưng cho từng nhóm gene với các kênh màu khác nhau Cy5 FAM Texas Red HEX để phát hiện các nhóm gene bla OXA-23 blaOXA-51 blaOXA-58 và gene 16S rRNA tương ứng trong cùng một phản ứng. Phản ứng multiplex real-time PCR này được tối ưu để đạt hiệu suất nhân bản tốt nhất cho tất cả các gene đích cần phát hiện. Kết quả Kết quả cho thấy quy trình có khả năng phát hiện chính xác các gene blaOXA-23 bla OXA-51 và blaOXA-58 đặc trưng của A. baumannii với độ nhạy 4 bản sao phản ứng và độ đặc hiệu cao không cho tín hiệu dương tính với DNA của nhiều loài vi khuẩn thường thấy trong bệnh viện. Kết luận Chúng tôi đã xây dựng thành công quy trình Taq-Man real-time PCR phát hiện một số nhóm gene blaOXA-23 blaOXA-51 và blaOXA-58 ở A. baumannii. Quy trình có thể được sử dụng để đồng thời phát hiện nhanh các chủng A. baumannii và một số nhóm gene kháng kháng sinh của chúng. Quy trình có thể được ứng dụng để nghiên cứu dịch tễ học phân tử về sự hiện diện một số nhóm gene blaOXA phổ biến ở
