Bài viết Đánh giá một số sinh phẩm và phương pháp tách chiết ADN vi khuẩn mycobacteria trên mẫu bệnh phẩm thu thập từ bệnh nhân nhiễm lao được nghiên cứu nhằm mô tả hiệu quả của phương pháp Salting - out kết hợp xử lý nhiệt mẫu bệnh phẩm lâm sàng trong tách chiết ADN từ vi khuẩn lao. | Nghiên cứu khoa học công nghệ ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ SINH PHẨM VÀ PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT ADN VI KHUẨN MYCOBACTERIA TRÊN MẪU BỆNH PHẨM THU THẬP TỪ BỆNH NHÂN NHIỄM LAO PHẠM THỊ HÀ GIANG 1 2 VŨ THỊ THƯƠNG 2 BÙI THỊ THANH NGA 2 PHẠM VIỆT HÙNG 2 PHẠM XUÂN THẾ ANH 3 LÊ THỊ LAN ANH 2 1. ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh lao là một trong những bệnh truyền nhiễm nguy hiểm gây ra bởi vi khuẩn lao Mycobacterium tuberculosis - MTB 1 . Trên toàn thế giới có khoảng 10 triệu người dao động từ 9-11 1 triệu được chẩn đoán mắc bệnh lao và 1 4 triệu ca tử vong do lao vào năm 2018 1 . Việc phát hiện và chẩn đoán bệnh chủ yếu dựa vào các yếu tố lâm sàng và cận lâm sàng như nhuộm soi đờm hay nuôi cấy tìm vi khuẩn lao 2 . Vi khuẩn lao và vi khuẩn lao không điển hình thuộc nhóm Mycobacteria có thể gây bệnh cho người vật nuôi và động vật hoang dã 3 4 . Các kỹ thuật vi sinh truyền thống như nuôi cấy trên môi trường Lowenstein - Jensen Middlebrook 7H10 7H11 được coi là tiêu chuẩn vàng để phát hiện Mycobacteria 2 8 tuy nhiên thời gian nuôi có thể kéo dài tới 8 tuần 2 9 . Trong khi đó việc chẩn đoán sớm vi khuẩn lao trên bệnh phẩm lâm sàng chủ yếu là đờm là vô cùng quan trọng để đưa ra phác đồ điều trị phù hợp 2 4 8 . Chính vì vậy các kỹ thuật sinh học phân tử như khuếch đại axit nucleic như Real-time PCR ngày càng được áp dụng rộng rãi để phục vụ chẩn đoán sớm và chính xác vi khuẩn lao. Tuy nhiên độ nhạy và độ đặc hiệu của Realtime PCR phụ thuộc vào chất lượng ADN sau quá trình tách chiết 3 10 . Không giống như các vi khuẩn khác thành tế bào Mycobacteria có cấu trúc phức tạp giầu axit mycolic và các mycolates ảnh hưởng lớn đến quá trình ly giải thành tế bào vi khuẩn để giải phóng ADN. Ngoài ra các mẫu bệnh phẩm đường hô hấp chứa nhiều chất ức chế phản ứng khuếch đại ADN vi khuẩn cần xử lý khử tạp loại nhiễm 3 . Các tạp chất và lượng tế bào lớn trong bệnh phẩm hô hấp ảnh hưởng lớn đến độ nhạy và độ đặc hiệu của phương pháp PCR nói chung. Theo nghiên cứu của Ramya Barani và cs độ nhạy và độ đặc hiệu của phương pháp .
