Sau khi pha sáng tạo ra ATP và NADPH2 giai đoạn tiếp theo của quang hợp là sử dụng ATP, NADPH2 để tổng hợp nên các chất hữu cơ từ CO2, đó là quá trình đồng hoá CO2. Quá trình đồng hoá CO2 là một chuỗi các phản ứng hoá sinh nhờ các enzim xúc tác. | Pha tối quang hợp -Chu trình Calvin-Benson. Sau khi pha sáng tạo ra ATP và NADPH2 giai đoạn tiếp theo của quang hợp là sử dụng ATP NADPH2 để tổng hợp nên các chất hữu cơ từ CO2 đó là quá trình đồng hoá CO2. Quá trình đồng hoá CO2 là một chuỗi các phản ứng hoá sinh nhờ các enzim xúc tác. Quá trình này chỉ sử dụng sản phẩm của ánh sáng tạo ra trong pha sáng là ATP NADPH2 dùng làm năng lượng và lực khử mà không dùng trực tiếp năng lượng ánh sáng nên được gọi là phản ứng tối pha tối. Có nhiều con đường đồng hoá CO2 xảy ra trong thực vật mỗi con đường đặc trưng cho một nhóm thực vật nhất định. Cho đến nay đã phát hiện được 3 con đường đồng hoá CO2 xảy ra ở lá đó là chu trình Calvin- Benson chu trình HatchSlack và chu trình CAM. Ngoài ra còn có quá trình đồng hoá CO2 xảy ra ở rễ. 1. Phương pháp nghiên cứu của Calvin. Vào những năm 1948-1954 hai nhà khoa học là Calvin và Benson đã dùng đồng vị phóng xạ C14 gắn vào CO2 để tiến hành nghiên cứu con đường biến đổi CO2 trong pha tối quang hợp. Bằng cách cho Chlorela quang hợp với 14CO2 sau những thời gian quang hợp xác định sau 1 2 3 . tiến hành cố định mẫu để không cho chlorela tiếp .