Tham khảo tài liệu 'hộp điện trong công nghệ dna part 20', kỹ thuật - công nghệ, điện - điện tử phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | sao chép ori vừa có các vị trí nhận biết cho các enzyme hạn chế như Eco RI Hin dlII Bam HI Sal I . Ở đoạn gen Ampr có bốn điểm nhận biết ở gen Tetr có tám điểm nhận biết những điểm này giúp dễ phát hiện các plasmid có gen ngoại lai gắn vào. Ví dụ nếu cắt plasmid bằng enzyme Bam HI 375 rồi gắn DNA ngoại lai vào chỗ cắt thì gen Tetr bị phân đôi do chèn đoạn DNA lạ vì thế tế bào mất khả năng kháng tetracycline nhưng vẫn kháng ampicillin. Plasmid này có khả năng sao chép độc lập với tế bào E. coli và tồn tại với số lượng trung bình 20-30 bản sao cho mỗi tế bào. Trong những điều kiện nuôi cấy nhất định có thể khuếch đại có chọn lọc làm tăng số plasmid đến hơn bản sao cho một tế bào. Hình . Plasmid vector pBR 322. Apx hay Ampì và Tef gen kháng ampicillin và tetracycline ori trình tự khởi đầu sao chép và một số vị trí nhận biết cho các RE. - Thế hệ thứ ba . L à các plasmid đa năng polycloning plasmid và chuyên dụng. Để tiện cho việc sử dụng nhiều lo ại RE khác nhau nhiều trình tự nhận biết của chúng được xếp nối tiếp nhau thành một đoạn dài gọi là polylinkers vùng đa nối hay multiple cloning sites các vị trí tạo dòng . Các plasmid vi khuẩn có thể chứa đoạn DNA ngoại lai khoảng 3-10 kb. Có 3 nhóm plasmid thông dụng hiện đang được bán rộng rãi trên thị trường như Nhóm các plasmid pUC. Kích thước khoảng bp mang gen Apỵ và một phần gen lacZ xen vào giữa gen lacZ là polylinker Hình . Các thành viên của nhóm này chỉ khác nhau do độ dài và chiều của polylinker. Các ưu điểm của nhóm này Kích thước nhỏ. Sự có mặt của gen lacZ 7 rất thuận tiện cho việc phát hiện vector tái tổ hợp. Vùng polylinker cho phép chèn vào gần như bất kỳ một trình tự DNA lạ nào. Hình . Plasmid vector pUC19 . Vị trí tạo dòng từ 396-447 được gắn vào gen lacZ nhưng không can thiệp vào chức năng của gen. Nhóm các plasmid pGEM Kích thước khoảng bp mang gen Amp gen lacZ polylinker và promoter đặc trưng cho các RNA polymerase SP6 T7 ở hai bên vùng polylinker cho phép phiên mã đoạn DNA .
