Giáo trình DNA tái tổ hợp part 7

Các BAC vector hiện nay được xem như công cụ hữu hiệu nhất trong việc xây dựng các thư viện genome, do chúng có các ưu điểm sau: - Có khả năng gắn các đại phân tử DNA 100-300 kb. - Ít hình thành thể khảm (chimera). - Có hiệu quả cao trong tạo dòng và thu hồi DNA. - Duy trì sự ổn định của các DNA được gắn vào vector. Nhờ những ưu điểm trên nên hệ thống BAC thường được dùng để xây dựng bản đồ vật lý. . | 3. Các cosmỉd vector Cosmid là plasmid vector mang đầu cos của À chương 4 . Vì thế các cosmid có thể được đóng gói trong các tiểu thể X với hiệu suất cao. Sau khi xâm nhiễm vào tế bào vật chủ DNA tái tổ hợp mạch thẳng tạo vòng ở đầu cos và tiếp đó được nhân lên như là một plasmid lớn. Giống như plasmid cosmid tương đối dễ thao tác nhưng có thể nhận các đoạn chèn genomic DNA có kích thước khoảng 40-45 kb lớn hơn khả năng của phage X. 4. Các BAC vector Các BAC vector hiện nay được xem như công cụ hữu hiệu nhất trong việc xây dựng các thư viện genome do chúng có các ưu điểm sau - Có khả năng gắn các đại phân tử DNA 100-300 kb. - Ít hình thành thể khảm chimera . - Có hiệu quả cao trong tạo dòng và thu hồi DNA. - Duy trì sự ổn định của các DNA được gắn vào vector. Nhờ những ưu điểm trên nên hệ thống BAC thường được dùng để xây dựng bản đồ vật lý. DNA có thể dễ dàng được phân lập trong các dòng BAC các dòng phân lập được từ lai khuẩn lạc sẽ được kiểm tra bằng kỹ thuật DNA fingerprinting thông qua phản ứng cắt của enzyme hạn chế Hindĩĩỉ. Kỹ thuật fingerprinting cung cấp cho chúng ta thông tin về những phần trùng lặp overlapping và không trùng lặp của BAC. Nhờ vậy có thể hoàn thiện bản đồ vật lý có chất lượng cao phục vụ cho việc phân tích genome và chuyển nạp gen sau này. 5. Các YAC vector Các YAC là các nhiễm sắc thể nhân tạo của nấm men và cũng là các vector tạo dòng được sử dụng trong phân tích genome. Chúng mang các đoạn telomere phần cuối và centromere phần tâm của một nhiễm sắc thể trong nấm men. Cả hai nhân tố này cần thiết cho sự tái bản của nhiễm sắc thể trong các tế bào nấm men nếu không có telomere thì sau đó các đầu của nhiễm sắc thể có khả năng bị rời ra hoặc gắn vào các nhiễm sắc thể khác. Nếu không có centromere thì sau đó các nhiễm sắc thể mới được tạo Công nghệ DNA tái tổ hợp 106 thành sẽ không được đẩy vào trong các tế bào mới của quá trình phân chia tế bào. Ngoài ra còn phải có một gốc tái bản để sao chép DNA. Các nhân tố này được đặt trong một đoạn DNA

Không thể tạo bản xem trước, hãy bấm tải xuống
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.