Chương 7 : Những vector cloning dành cho các loại tế bào chủ trừ Hầu hết những thí nghiệm cloning được dùng làm tế bào chủ và nhiều loại vector phù hợp với vi khuẩn này. được sử dụng phổ biến khi thí nghiệm cloning nghiên cứu về những đặc điểm của sinh học phân tử như cấu trúc, chức năng gen. Tuy nhiên trong những trường hợp đặc biệt thì ta có thể sử dụng những tế bào chủ khác. Điều này có thể không giúp nghiên cứu gen nhưng ta có thể điều khiển hay cải. | Chương 7 Những vector cloning dành cho các loại tế bào chủ trừ Hầu hết những thí nghiệm cloning được dùng E. coli làm tế bào chủ và nhiều loại vector phù hợp với vi khuẩn này. E. coli được sử dụng phổ biến khi thí nghiệm cloning nghiên cứu về những đặc điểm của sinh học phân tử như cấu trúc chức năng gen. Tuy nhiên trong những trường hợp đặc biệt thì ta có thể sử dụng những tế bào chủ khác. Điều này có thể không giúp nghiên cứu gen nhưng ta có thể điều khiển hay cải thiện sự tổng hợp sản phẩm trao đổi chất ví dụ như hormone insulin hay thay đổi đặc tính của sinh vật ví dụ như việc đưa gen kháng thuốc diệt cỏ vào cây trồng . Do đó chúng ta cần quan tâm đến những vector cloning dành cho những tế bào chủ khác ngoài E. coli. Vector dành cho nấm men và những loài nấm khác Nấm men Saccharomyces cerevisiae là loài sinh vật quan trọng trong công nghệ sinh học. Nấm men có vai trò trong sản xuất bia bánh mì. Ngoài ra nó còn được sử dụng như vật chủ trong sản xuất các loại dược phẩm từ những gen được clone. Việc khám phá ra một loại plasmid tồn tại trong hầu hết các chủng nấm men S. cerevisiae đã thúc đẩy mạnh mẽ sự phát triển của những dòng vector cloning dành cho nấm men hình . Plasmid là một vòng có kích thước 2 pm là một trong những plasmid có số lượng giới hạn chỉ tìm thấy trong tế bào eukaryote. Hình Plasmid 2 pm của nấm men REP1 và REP2 phải có trong bản sao của plasmid và FLP mã hóa protein mà có thể biến đổi từ dạng A sang dạng B của plasmid. Tại FLP trình tự gen được sắp xếp lại bằng sự tái tổ hợp nội phân tử. Chức năng của vùng D chưa được biết chính xác. Marker chọn lọc cho plasmid 2 pm Vòng 2 pm phù hợp là vector cloning kích thước 6 kb tồn tại trong tế bào nấm men với số lượng copy khoảng 70-200. Việc nhân đôi plasmid yêu cầu một số yếu tố tham gia ori trên plasmid vài enzyme được cung cấp từ tế bào chủ các protein được mã hóa từ gen REP1 và REP2 nằm trên plasmid. Tuy nhiên plasmid 2 pm làm vector cloning không phải là hoàn toàn .
