K2HPO4 Triamonium citrate MgSO4 MnSO4 Tween 80 Bromocresol purple CaCO3 Agar Nƣớc cất Đun sôi môi trƣờng cho hòa tan Hấp khử trùng ở 1150C/30 phút . Môi trƣờng Nutrient broth (NB) Cao thịt Peptone NaCl Nƣớc cất pH 7,0 0,2 Hấp khử trùng ở 1210C/20 phú | 51 PHỤ LỤC 1. Thành phần môi trường . Môi trường GYE agar Glucose Yeast Extract Cao nấm men Peptone D-glucose K2HPO4 kh2po4 MgSO4 Bromocresol purple 1ml Khoáng vi lượng Nước vô trùng 1000ml Agar 15g pH 0 2 Thành phần khoáng vi lượng NaCl 500mg 900mg 800mg 80mg 80mg 80mg Nước vô trùng 50ml Đun sôi môi trường cho hòa tan Hấp khử trùng ở 1150C 30 phút . Môi trường MRSA Cao thịt 8g Peptone 10g Cao nấm men 4g Glucose 10g Acetate Na 5g 52 K2HPO4 2g Triamonium citrate 2g MgSO4 0 2g MnSO4 0 2g Tween 80 1ml Bromocresol purple 1ml CaCO3 2g Agar 16g Nước cất 1000ml Đun sôi môi trường cho hòa tan Hấp khử trùng ở 1150C 30 phút . Môi trường Nutrient broth NB Cao thịt 5g Peptone 10g NaCl 5g Nước cất 1000ml pH 7 0 0 2 Hấp khử trùng ở 1210C 20 phút . Môi trường lên men đường Cao thịt 5g Peptone 10g NaCl 5g Đường 10g Phenol red 0 01g Nước cất 1000ml . Môi trường thạch bán lỏng Nutrient broth 13g Agar 5g Nước cất 1000ml pH 7 2 0 2 53 Đun sôi môi trường cho hòa tan Hấp khử trùng ở 1210C 2O phút 2. Hóa chất . Nước muối sinh lý NaCl 9 0 NaCl 9g Nước cất 1000ml . NaOH 0 1N NaOH 40g Nước cất 1000ml Cân 40g NaOH tinh thể hòa vào 50ml nước cất lắc đều để yên 24h gạn lấy nước trong ở trên rồi bổ sung thêm nước cất cho đủ 1000ml. 3. Thuốc nhuộm . Crystal violet a Crystal violet cồn 960 10ml b phenol 1g nước cất 100ml Trộn 2 dung dịch a và b lại với nhau khuấy cho hòa tan đều rồi đem lọc. Thuốc nhuộm được bảo quản trong chai màu tối. . Fuchsine kiềm a Fuchsine kiềm 0 3g Ethanol 960 10ml b Phenol 5g Nước cất 35ml Trộn 2 dung dịch a và b lại với nhau khuấy cho hòa tan đều rồi đem lọc. Thuốc nhuộm phải được bảo quản trong chai màu tối. Trước khi dùng pha loãng 5 lần dịch pha loãng không giữ được lâu còn dịch đậm đặc có thể giữ trong nhiều tháng . . Lugol KI .
