Trong bất kỳ một loại mẫu vật nào, muốn biết số lượng chung của các nhóm vi sinh vật cũng như số lượng riêng của mỗi nhóm thành phần, đều cần phải đếm số lượng tế bào của chúng. Để xác định số lượng vi sinh vật trong đất, nước, không khí và dịch nuôi cấy người ta có thể sử dụng nhiều phương pháp khác nhau. Trong đó có 2 phương pháp dưới đây được dùng nhiều hơn cả : - Phương pháp xác định trực tiếp số lượng tế bào bằng phiến kính có khung đếm. | Thí nghiệm vi sinh vật học Xuân Phương BÀI 5 CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH SỚ LƯỢNG TÉ BÀO VI SINH VẬT Trong bất kỳ một loại mẫu vật nào muốn biết số lượng chung của các nhóm vi sinh vật cũng như số lượng riêng của mỗi nhóm thành phần đều cần phải đếm số lượng tế bào của chúng. Để xác định số lượng vi sinh vật trong đất nước không khí và dịch nuôi cấy . người ta có thể sử dụng nhiều phương pháp khác nhau. Trong đó có 2 phương pháp dưới đây được dùng nhiều hơn cả - Phương pháp xác định trực tiếp số lượng tế bào bằng phiến kính có khung đếm Goriaep phòng đếm hồng cầu . - Phương pháp xác định gián tiếp số lượng tế bào bằng cách đếm số lượng khuẩn lạc mọc trên môi trường thạch. Nói chung cả 2 phương pháp trên đều phải tiến hành theo 2 bước sau đây I. Chuẩn bị mẫu Để xác định gián tiếp hoặc trực tiếp tế bào vi sinh vật . Lấy mẫu Tuỳ theo loại vật phẩm cần xác định mà ta lấy mẫu để nghiên cứu với số lượng và khối lượng khác nhau cho phù hợp. Yêu cầu của việc lấy mẫu. - Lấy mẫu có tính chất đại diện. - Lượng mẫu lấy vừa phải đủ để phân tích các đặc tính lý hoá sinh học. - Dụng cụ lấy mẫu chứa mẫu phải vô trùng. - Lấy mẫu xong phải phân tích ngay và không được để quá 24h. - Mẫu lấy phải có nhãn ghi ký hiệu và ghi vào sổ những đặc điểm của mẫu và nơi thu mẫu. . Pha loãng mẫu Chuẩn bị một số bình tam giác chứa 90ml nước cất vô trùng một số ống nghiệm chứa 9ml nước cất vô trùng và một số ống hút 1ml vô trùng. a. Mầu ở trạng thái lỏng - Pha loãng mẫu theo dãy thập phân 57 Thí nghiệm vi sinh vật học Xuân Phương Hình Phương pháp pha loãng mâu theo dãy thập phân b. Nếu mẫu nghiên cứu ở trạng thái đặc như đất lương thực thực phẩm - Chuẩn bị 2 bình hình nón có dung tích 250 ml Bình 1 chứa 90ml nước cất vô trùng Bình 2 đã vô trùng và không chứa gì - Khử trùng cối chày sứ bằng cách cho một ít cồn vào và đốt lên. Sau đó để nguội. - Cân 1 g đất hoặc mẫu cho vào cối sứ và nghiền nát mẫu. - Dùng toàn bộ nước ở bình 1 để chuyển toàn bộ mẫu sang bình 2. - Lắc 5 phút để .
